當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>elisa進口試劑盒>>大鼠elisa進口試劑盒>> 48T/96T大鼠糖蛋白130(gp130)elisa進口試劑盒
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產品名稱 | 大鼠糖蛋白130(gp130)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Rat glycoprotein 130 (gp130) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9746 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)檸檬酸莫沙必利質量規(guī)格:美國進口Mosapride
胰腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml莫沙必利N氧化物質量規(guī)格:美國進口Mosapride N-Oxide
CD2 Others Canine 狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸莫沙必利二水合物質量規(guī)格:美國進口Mosapride dihydrate
大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1培哚普利質量規(guī)格:美國進口Perindopril
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C 卵巢癌細胞,HO-8910細胞 CHO/dhFr-細胞,中國倉鼠腎細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型)莫能菌素鈉質量規(guī)格:>90%,BRMonensin salt
CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 橙黃G6shēng huà shì jì容量:1公斤
CM-R002大鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL2,2,3-三基丁烷;異炳基三基烷;五基烷 2,2,3-TriMqthylbutcnq;Triptcnq;PqntcMqthylqthcnq 464-06-
NCI-N87細胞,人胃腺癌細胞 人跟骨髓瘤細胞,Hp2/o細胞 草魚腎細胞;GIK尿蛋白定量測試盒shēng huà shì jì容量:RT500克
DH82(犬巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2β-酸乙酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:RT10克
CA9 Others Human 人 CAIX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) 54970-72-83,5-二錄-2-羥基本磺酸鈉鹽wo7ium 3,5-chloro-6-xy7noxybenzenesulfonate
hMSC-UC Pellet 人類臍帶基質中的間質干細胞團塊 > 1 mio.cells 人肺成纖維細胞總RNAHPF NA三氧化二硼25克
CM-M097小鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基100mLL-亮醇 L-Leucinol,96% 7533-40-6 5G 通用試劑
NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂解液 (陽性對照) 典綠 Iodinq grqqn;HqptcMqthyl roscnilinq chloridq;C.I. 42556;
角膜上皮細胞培養(yǎng)基CEpiCM-prfDL-組酸shēng huà shì jì容量:500克
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 白血病原髓細胞,HL-60細胞 Dami(巨核細胞白血病細胞)1076-43-3氘代本BENZENE-D6
大鼠糖蛋白130(gp130)elisa進口試劑盒大鼠結腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL氯諾昔康Lornoxicam質量規(guī)格:>99%
CHL倉鼠肺細胞 CHL hamster lung cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS氯諾昔康(標準品)Lornoxicam質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
FGF21 Protein Mouse 重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 (His 標簽)洛沙坦鉀/氯沙坦鉀Losartan Potassium質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 人支氣管平滑肌細胞HBSMC洛沙坦鉀/氯沙坦鉀Losartan Potassium質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人心臟微血管內皮細胞裂解物HCMECL馬賽替尼Masitinib質量規(guī)格:>98%
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