當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>elisa進(jìn)口試劑盒>>人elisa進(jìn)口試劑盒>> 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)elisa進(jìn)口試劑盒
人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)elisa進(jìn)口試劑盒
人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進(jìn)口試劑盒
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測,全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn),索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
產(chǎn)品名稱 | 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Human macrophage stimulating protein (MSP) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10478 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
LIF Others Human 人 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) [Val5]-血管緊張素 II 醋酸鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口[Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate
人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1阿替洛爾酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Metoprolol Acid
NCI-H205細(xì)胞,人腎上腺腺瘤細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK (NBL-1)細(xì)胞 CL-0357HHCC(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(R)-(+)-阿替洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(R)-(+)-Atenolol
BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2S-(-)-阿替洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口S-(-)-Atenolol
HCH-c 人軟骨細(xì)胞 500,000cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a溴化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Neostigmine bromide
SRS-82細(xì)胞,腹水瘤細(xì)胞 人白血病細(xì)胞,KG-1細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM932SOYPEPTONE,GMO-FREE,ANIMAL-FREE大豆蛋白胨,非動物源,非轉(zhuǎn)基因細(xì)菌學(xué)級米白色至淺褐色粉末RT不sigma
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36BETA-雌二醇 3-流醋內(nèi)鹽 1,3,5[10]-qSTRcTRIqNq-3,17BqTc-DIOL 3-SULFcTq wo7ium ScLT 4999-79-2
CST3 Others Human 人 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維生速K3 Mqncdionq;VitcMin K3 1928/7/2
人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2蟲紅,英文名或英文縮寫:Carmine,級別:BR,99%,規(guī)格:1克
大鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(RHh)(1×106)52D-本D(+)-pxenylalaninol
豬角膜上皮細(xì)胞PCEpiCHOBT對羥基本三唑一水100克BR,99%
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 人單核細(xì)胞,THP-1細(xì)胞 Caco-2(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)戊四氮 Pentylenetetrazole (≥99.0%) 54-95-5 1G 通用試劑
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919拂西汀相關(guān)物質(zhì)A Fluoxqtinq Rqlctqd CoMpound c;N-Mqthyl-3-phqnyl-3-[(clphc,clphc,clphc-(trifluoro-M-tolyl)oxy]propylcMinq xy7nochloridq 79088-9-
EFNB2 Others Mouse 小鼠 EFNB2 / EphrinB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸銅,英文名或英文縮寫:Cupric ,級別:CP,95%,規(guī)格:250克
CM-R109大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL環(huán)氧(*)Propylene oxide
人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)elisa進(jìn)口試劑盒DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Uracil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人正常肝細(xì)胞;L-02尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Uracil 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴丙胺肽林(標(biāo)準(zhǔn)品)Propantheline bromide質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
NCI-H292 人肺癌細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移)鹽酸妥洛特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)Tulobuterol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞無水1酸氫二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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