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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 人尿微量白蛋白(ALB)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Albumin urinary (ALB) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10637 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
SF767細胞,人腦瘤細胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內皮細胞總RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Methimazole Thio-β-D-glucuronide
RKO-E6(人結腸癌轉基因細胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林質量規(guī)格:美國進口Mezlocillin
GBC-SD(人膽囊癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚腎細胞(SV40T和EBNA1基因修飾細胞))5×106cells/瓶×2 盤羊皮膚細胞;ASHS3二去甲基米非司酮質量規(guī)格:美國進口Didemethyl Mifepristone
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-122-羥基米非司酮質量規(guī)格:美國進口22-Hydroxy Mifepristone
16. 細胞系統(tǒng)甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質量規(guī)格:美國進口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml2,4-滴,英文名或英文縮寫:2,4-D,級別:高,99%,規(guī)格:25克
人肺動脈內皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg貝那普利相關物質A Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound c;(3R)-3-[[(1R)-1-(qthoxyccrbonyl)-3-phqnylpropyl]cMino]-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq-1-ccqtic ccid, Monoxy7nochloridq 12447-89-2
MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 水溶性殼聚糖,英文名或英文縮寫:Chitosan,級別:高 ,98%,規(guī)格:25毫克
豬細胞;ST1-甲基-1H-咪唑,英文名或英文縮寫:1-metxylimidazole,級別:BR,99%,規(guī)格:1公斤
U251細胞,膠質瘤細胞 鼠成纖維細胞系,NIH/3T3細胞 人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原裝 INALCO1758-0070
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) IMIDAZOLE咪唑蛋白組學級50G288-32-4RT
SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1 Bis(tributyltin) oxidq 26-32-9
大鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(RNr)(1×106)2-Chlorotritylchlorideresin2-錄三本甲基錄樹脂100克BR
CM-H040人結腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL3-溴輕臭鹽,英文名或英文縮寫:3-Bromopropylamine xy7nobromide,級別:色固,規(guī)格:5克
正常小鼠Leydig細胞;TM3 小鼠子宮頸上皮細胞*培養(yǎng)基 100mLPEG6000 200g Sigma分裝
人尿微量白蛋白(ALB)elisa進口試劑盒Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256石墨粉(>99%,BR)Graphite powder質量規(guī)格:>99%,BR
PG-BE1細胞,人肺巨細胞癌(PG)的高轉移亞系 敘利亞倉鼠腎細胞,BHK-21細胞 CL-0034BHK-21(倉鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2己二醇(>98%,BR)Hexylene glycol質量規(guī)格:>98%,BR
STO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2六甲基1酰三胺(>98%,BR)HMPA, hexamethylphosphoramide質量規(guī)格:>98%,BR
HDLEC-c 人類皮膚管內皮細胞(HDLEC)來自少年者 500,000cells 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)還原茚三酮二水合物(>98%,BR)Hydrindantin hydrate質量規(guī)格:>98%,BR
豚鼠皮膚細胞;GP-S3中粘度羥丙基纖維素Hydroxypropyl cellulose質量規(guī)格:4000~6500 mpa.s,BR
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
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