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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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鉤端螺旋體通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒 分子生物學(xué)儀器

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更新時(shí)間:2022-10-04 09:37:12瀏覽次數(shù):174次

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  • 產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
    適用領(lǐng)域 科研 貨號(hào) BJ-P6933
    鉤端螺旋體通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:Goat Anti-Chicken IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1mlC22orf9 22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框9抗體 規(guī)格: 0.2mlCCDC112/MBC1 膀胱突變蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlProstatic Acid Phosphatase 前列酸性磷酸抗體 規(guī)格: 0.2mlANP32C

    實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

    一、試劑準(zhǔn)備

    1. DNA模板

    2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

    3.10×PCR Buffer

    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

    5.Taq酶

    特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

    產(chǎn)品名稱

    英文名稱

    規(guī)格

    貨號(hào)

    鉤端螺旋體通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

    Leptospira spp.PCR

    多種規(guī)格

    BJ-P6933

    QQ截圖20191204143322.jpg

    實(shí)驗(yàn)外包:

    1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

    2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

    3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

    4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

    5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

    6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

    7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

    8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

    特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):

    1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。

    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。

    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

    4.   實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

    5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。1.jpg


     

    二、操作步驟

    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

    10×PCR buffer             5μl

    dNTP mixl                 4μl

    引物110pM              2μl

    引物210PM             2μl

    Taq酶(2U/μl           1μl

    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

    加ddH2O              50 μl

    視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

    4PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

    三、注意事項(xiàng)

    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

    2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

    3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

    6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。

     

     

    操作流程

    1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

    2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

    3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

    4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

    5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

    6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

    7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

    8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

    9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

    10mg 肌酸二鈉鹽 Creatine Phosphate Disodium Salt -20℃保存

    2 ug pMyr pMyr 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span style="font-size: 14px; font-family: Calibri;">)

    2 ug pLVX-shRNA2 pLVX-shRNA2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL FK506結(jié)合蛋白5(FKBP5)ELISA試劑盒

    干酪素  250g 0.156-10 ng/mL 人磷脂?;嫉鞍拙厶?span style="font-size: 14px; font-family: Calibri;">1 (Glypican-1)ELISA試劑盒

    50T 嗜肺軍團(tuán)菌16S rRNA基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒(探針?lè)?span style="font-size: 14px; font-family: Calibri;">)  低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1

    50mL 苯基介質(zhì) Pheny Medium 常溫保存

    2.5ku L- 乳酸脫氫 ( 兔肌 ) L-Lactic Dehydrogenase From Rabbit Muscle Type II 4℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor C

    100UN β- 葡萄糖苷 β-Glucosidase   4℃保存進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)100

    2 ug pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 6.25-400 ng/mL 小鼠腫瘤排斥抗原p815a(Trap1a)ELISA試劑盒

    MI培養(yǎng)基 MI Medium 1000ml 0.78-50 ng/mL 人γ突觸核蛋白(SYUG)ELISA試劑盒

    1g 二腺 ADP Na2 -20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Alkaline phosphatase, placental type

    鉤端螺旋體通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒iCRT 14  β-catenin-responsive transcription抑制劑  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

    Cediranib  VEGFR2抑制劑(Cediranib)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

    BIBF 1120 esylate  VEGFR/FGFR/PDGFR抑制劑(尼達(dá)尼布乙磺酸鹽)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

    DCC-2618  c-Kit和c-Met抑制劑(DCC-2618)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

    PD 169316  p38MAP激酶抑制劑(PD 169316)  1mL(10mM)|10mg|50mg

    PHA-848125  CDK/TRK抑制劑(PHA-848125)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

    Flavopiridol Hydrochloride  CDK廣譜抑制劑  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

    ML-323  USP1-UAF1抑制劑(ML-323)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

    Z-IETD-FMK  caspase8抑制劑(Z-IETD-FMK)  1mL(10mM)|1mg|5mg

    AZD0156  ATM激酶抑制劑(AZD0156)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

    SBI-0206965  自噬激酶ULK1抑制劑(SBI-0206965)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg


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