當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 藻類保色液Ⅱ
貨號 | FS-X10198 |
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培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:藻類保色液Ⅱ
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
貨號:FS-X10198
產(chǎn)品介紹:
用途: 用于除綠藻外的其他藻類的保色保存。 注意事項: 主要由硫酸銅、乙醇、福爾馬林等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
桿菌屬腸高血糖相關肽抗體Human TRIP4 大鼠瘦(LEP)免疫試劑盒
墳墓節(jié)桿菌葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10抗體Human TRPC6 大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
動物雙歧桿菌乳亞種腸高血糖相關肽抗體Human TRPM1 大鼠嗜性粒過氧化物(EPO)免疫試劑盒
核盤菌G蛋白偶聯(lián)受體120抗體Human TRPM5 大鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌G蛋白偶聯(lián)受體40抗體Human HNRNPF(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F) 大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A(CyPA)免疫試劑盒
假單胞菌屬20號染色體開放閱讀框100抗體Human TRMT1 大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒
朱紅鏈霉菌促性腺釋放激受體2抗體Human TRIM44 大鼠生長抑(SS)免疫試劑盒
煙曲霉G蛋白偶聯(lián)受體106抗體Human TRIM46 大鼠生長激(GH)免疫試劑盒
越桔假絲酵母G0/G1期開關調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human TPM4(Tropomyosin-4) 大鼠生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒
巨孢毛霉G蛋白偶聯(lián)受體GPR162蛋白抗體Human TPPII 大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫試劑盒
兩型孢毛霉鋅指蛋白461抗體Human TRIM5 大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)免疫試劑盒
扣囊復膜孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體Human TPP1 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒
黑曲霉G激錨定蛋白1抗體Human TPPP2 大鼠腎(Renin)免疫試劑盒
大腸埃希菌DNA修復蛋白GIYD2抗體Human TPPP3 大鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌生長抑制和分化相關蛋白抗體Human TOR3A(Torsin family 3 member A) 大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒
溜曲霉生發(fā)中心相關核蛋白MCM3抗體Human TOR1AIP1 大鼠腎上腺(EPI)免疫試劑盒
紫褐牛肝菌Boletus│violaceofuscus W. F. Chiu 質(zhì)量規(guī)格:TLC五味子
: HBUM172183資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:AR歐當歸內(nèi)酯A
產(chǎn)朊假絲酵母Candida│utilis 質(zhì)量規(guī)格:99.99%,1-3mm千金子二萜二乙酰酰酯
藻類保色液Ⅱ綠僵 5-氟吡啶-3-甲血管生成2
芹側(cè)耳(杏鮑菇) 雙環(huán)[2.2.2]辛烷-2,5-二烯-2-羧乙酯血管生成受體酪激1
解脂亞羅酵母 5-硝基吡唑-3-羧乙酯血管性血友病因子
植物乳桿 3-(4-苯甲酰)血紅蛋白
松衫暗孔 3-酮庚甲酯血紅氧合1
側(cè)孢短芽孢桿 脒鹽鹽血肌酐
短芽孢桿 4-(4-溴苯基)吡啶血漿前激肽釋放
釀膿鏈球 6-苯基吡啶-2-羧血尿
茄鏈格孢 6-甲基-3-氨基-2-吡啶血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1
小煤炱屬 3-溴-5-鹽鹽血清淀粉樣蛋白A
羊邊蟲(綿羊無漿體—永壽株) 3,5-二-4-甲血清鐵
下彎巴克斯霉 3--4-羥基血清鐵蛋白
黃綠木霉 2-氨基間苯二甲血清總補體
黃海芽孢桿 3-羥基丁縮二甲血栓A2
雙孢蘑菇(可訂購) 1-(2-)哌血栓B2
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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