1、原理及適用范圍

阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中，在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病，且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀，引起的死亡率高達(dá)50％以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān)，奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。 阪崎腸桿菌測(cè)試片（FilmplateTMEnterobacter sakazaiiBQ208）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成，簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序，更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測(cè)。參照標(biāo)準(zhǔn)：食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物檢驗(yàn)坂崎腸桿菌檢驗(yàn)（GB 4789.40）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品100mL（g），加入已預(yù)熱至44℃裝有900mL專用增菌液的錐形瓶中，用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解，44℃±0.5℃，增菌培養(yǎng)6-8h。

2.2、接種：將阪崎腸桿菌測(cè)試片（BQ208）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL經(jīng)過(guò)增菌的樣品液，慢慢均勻地滴加到濾紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s使培養(yǎng)基凝固，每個(gè)樣品接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。

2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結(jié)果判讀

對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌，為陽(yáng)性結(jié)果；無(wú)任何點(diǎn)為陰性結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。

4、結(jié)果報(bào)告

在100mL（或100g ）樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。

5、附加說(shuō)明

5.1、經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，測(cè)試片具有很好的特異性，接種阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn)，接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時(shí)，一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀，此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因，不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀；而、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。

5.2、多次試驗(yàn)結(jié)果阪崎腸桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)限為4cfu/mL，與平皿法的符合率均在80％以上。

5.3、專用增菌液的配制和滅菌：取一包專用粉，倒入1000mL的三角錐瓶中，加入900mL純凈水，加塞后加熱至沸，保持20分鐘，冷卻后當(dāng)天使用。有條件可采用115℃高壓滅菌15min。

5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。