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色譜篩選確定哪些是的
適合特定的目標(biāo)蛋白。組合a
濾板和色譜樹脂是一種的形式

分析蛋白質(zhì)的結(jié)合和洗脫特征
利益。下面的協(xié)議描述了三個的分離
蛋白質(zhì)使用HEA HyperCel，混合模式樹脂
與AcroPrep Advance過濾板。這是一個例子
的一個分離程序，可以在一個整體純化過程。
？AcroPrep帶1.2靘Supor的過濾板膜，PN 8039
？HEA HyperCel樹脂，PN 20250-033
？真空歧管，PN 501
2.通過加入等量的50％（體積/體積）的樹脂漿料體積的結(jié)合緩沖液。
3.將收集板放在濾板下面。
快速吸取100μL樹脂漿液（50μL樹脂）

真空/壓力泵，PN 13157

1.洗滌適當(dāng)體積的HEA HyperCel樹脂a

Z少兩，總共少20個樹脂

體積的結(jié)合緩沖液在錐形管中（去除

存儲緩沖器）。 以1,000xg離心2-5分鐘。

過濾板。 經(jīng)?；旌蠞{料以避免沉降
和向板的不*的體積輸送。
4.通過應(yīng)用從孔中除去多余的液體

10-20英寸Hg（0.34-0.68巴）真空10-15秒。
對所有液體收集步驟使用這些設(shè)置。
5.將100μL蛋白樣品加載到樹脂上。 （50μL
的HEA HyperCel樹脂床，210μg總蛋白加入。）
6.使用板式混合器*混合內(nèi)容物20分鐘，以便于結(jié)合。

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