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聯(lián)系人：劉少坤

技術(shù)文章

暗視野顯微鏡的原理和使用方法

閱讀：1發(fā)布時間：2024-12-11

暗視野顯微鏡(dark field microscope)的聚光鏡有擋光片，使照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。暗視野顯微鏡的原理和使用方法：

　　1、原理：暗視野顯微鏡是利用丁達(dá)爾(Tyndall)光學(xué)效應(yīng)的原理，在普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的光束被阻擋。不能由下而上地通過標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上，標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)，因而整個視野是黑暗的。

　　2、適用范圍：暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環(huán)境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運(yùn)動和表面特征，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。

　　3、使用方法

　　(1)把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。

　　(2)選用強(qiáng)的光源，但又要防止直射光線進(jìn)入物鏡，所以一般用顯微鏡燈照明。

　　(3)在聚光器和標(biāo)本片之間要加一滴香柏油，目的是不使照明光線于聚光鏡上面進(jìn)行全反射，達(dá)不到被檢物體，而得不到暗視野照明。

　　(4)升降集光器，將集光鏡的焦點對準(zhǔn)被檢物體，即以圓錐光束的頂點照射被檢物。如果聚光器能水平移動并附有中心調(diào)節(jié)裝置，則應(yīng)首行中心調(diào)節(jié)，使聚光器的光軸與顯微鏡的光軸嚴(yán)格位于一直線上。

　　(5)選用與聚光器相應(yīng)的物鏡，調(diào)節(jié)焦距，找到所需觀察的物像。


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