在免疫熒光（Immunofluorescence，IF）實(shí)驗(yàn)中，通常會(huì)在同一組織細(xì)胞標(biāo)本上同時(shí)檢測兩種抗原，因而進(jìn)行雙重?zé)晒馊旧ㄖ苯臃ê烷g接法）。一般來說，直接法簡便可靠，但靈敏度較低，而且抗體來源較少；因此，大部分人會(huì)選擇間接免疫熒光法：先用兩種不同種屬來源的特異性一抗孵育，再用對應(yīng)的不同熒光素標(biāo)記的二抗孵育，從而在熒光顯微鏡下觀測。
在免疫熒光實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)候也需要同時(shí)對兩個(gè)或多個(gè)目標(biāo)蛋白進(jìn)行共定位。此時(shí)，可以選擇兩個(gè)帶有不同熒光顏色標(biāo)記的一抗；然而，在更多的情況下，需要通過兩到三種不同種屬來源的未標(biāo)記一抗，再配合兩到三種帶不同熒光標(biāo)記的二抗以實(shí)現(xiàn)IF 雙標(biāo)或三標(biāo)。那么該如何選擇合適的免疫雙標(biāo)/多標(biāo)實(shí)驗(yàn)的二抗？
首先需要考慮熒光顏色的選擇
紅色和綠色是常見的兩種熒光選擇，綠色如FITC、Cy2或新一代Dylight 488等熒光染料；橙色如TRITC、Cy3 等熒光染料，而Texas Red則顯示紅色，Cy5、Cy7、APC或新一代熒光染料Dylight 649等則提供了深紅色顯示方案。目前IF雙標(biāo)一般優(yōu)先選擇紅色和綠色；如果是三標(biāo)，則第三種顏色選擇藍(lán)色，如AMCA 或者新一代Dylight 350、Dylight 405等。IFkine®系列熒光二抗來自于一代的熒光標(biāo)記基團(tuán)，在熒光強(qiáng)度、信噪比以及熒光的耐淬滅性上遠(yuǎn)遠(yuǎn)由于通用的FITC、TRITC、羅丹明等常規(guī)熒光基團(tuán)的優(yōu)勢，同時(shí)具有接近或優(yōu)于第二代熒光染料Alexa Flour和Dylight的熒光表現(xiàn)。其IFkine® Green提供綠色標(biāo)記方案，IFkine® Green則是Cy3和羅丹明的替代物，IFkine® Red則為Texas Red提供更*的紅色熒光方案。該系列熒光團(tuán)具有更高的熒光強(qiáng)度、更低的背景、更佳的抗淬滅性以及優(yōu)異的性價(jià)比。
另外二抗的類型對IF雙標(biāo)/多標(biāo)也有莫大的影響
在免疫熒光雙標(biāo)或多標(biāo)時(shí)，首先樣本本身的復(fù)雜條件可能會(huì)產(chǎn)生與二抗的非特異性雜交；另外，由于同時(shí)有兩個(gè)一抗分子，因此一抗與二抗之間也有一定的非特異性結(jié)合。IFkine®系列熒光二抗經(jīng)過特別優(yōu)化，其針對目的種屬的特異性非常高，同時(shí)針對其他非目的種屬的抗體分子的非特異性結(jié)合降到低，同時(shí)避免了二抗與樣本以及其它一抗的非特異性雜交。
在二抗的種屬來源角度，因?yàn)樾枰紤]一抗的不同種屬來源，以及免疫熒光封閉血清的選擇。二抗的種屬與一抗的種屬有所區(qū)別，同時(shí)考慮到血清的種屬來源要與二抗*，所以優(yōu)的情況是，IF多標(biāo)實(shí)驗(yàn)中二抗的種屬來源于非小鼠、非兔、非山羊，而是選擇驢、馬、雞等種屬來源，并且二抗采用一樣的種屬來源，這樣可以一種來源的血清完成兩個(gè)抗體的封閉。IFkine®系列熒光二抗均來源于驢，可以配合驢血清進(jìn)行封閉，效果非常好，在免疫熒光雙標(biāo)以及多標(biāo)實(shí)驗(yàn)中有更出眾的表現(xiàn)。IFKine®系列熒光（IFKine Green、IFKine Orange和IFKine Red）的激發(fā)光譜：
| IFKine®熒光團(tuán) | 激發(fā)光 | 發(fā)射光 | 發(fā)射顏色 | 替代基團(tuán) |
| IFKine Green | 493nm | 518nm | 綠色 | FITC/Cy2/Alexa 488/Dylight 488 |
| IFKine Orange | 555nm | 570nm | 橙色 | Cy3/Rhodamin/Alexa 555/Dylight 549 |
| IFKine Red | 591nm | 615nm | 紅色 | Texas Red/Alexa 594/Dylight 594 |
作為*的系列新型熒光抗體產(chǎn)品，IFKine®具有市場上高的熒光染色亮度和耐光性，并兼具較少的非特異性雜交和背景，非常適合作為免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)。驢來源二抗以確保在多標(biāo)使用中的通用型，并且經(jīng)過特殊處理，其與其它種屬來源的蛋白樣本或抗體幾乎沒有交叉反應(yīng)，因此其在免疫熒光分析的雙標(biāo)以及多標(biāo)實(shí)驗(yàn)中有更出眾的表現(xiàn)。我們向您*美國Abbkine*的液體形式的小包裝IFKine®系列熒光二抗產(chǎn)品，目前推出的產(chǎn)品主要是：
| 產(chǎn)品名稱 | 品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品說明 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24211 | 詳情 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L) | Abbkine | A24221 | 詳情 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG(H+L) | Abbkine | A24231 | 詳情 |
| IKine Orange AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24311 | 詳情 |
| IFKine Red AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24411 | 詳情 |
| IFKine Red AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L) | Abbkine | A24421 | 詳情 |
上述產(chǎn)品，Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場，提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障，如果您在使用過程中有任何問題，請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?/p>
美國Abbkine品牌是一家提供高性價(jià)比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌，艾美捷將其引入中國，作為其中國
區(qū)域代理，將為客戶提供的常規(guī)免疫學(xué)試劑，如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗，抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家品牌的的中國代理或區(qū)域代理，艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，請致電免費(fèi)客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。
武漢艾美捷科技有限公司
WuHan AmyJet Scientific Inc.
武漢市洪山區(qū)雄楚大道450號(hào)名都花園111座1單元7A
111-1-7A MingDu HuaYuan, 450 XiongChu Road, HongShan District, WuHan, HuBei, China
：+86-/84454876 +86--816 *：
Phone: +86-/84454876 +86--816 Toll-free :
: info@amyjet.com ：http://www.amyjet.com
: info@amyjet.com Website: http://www.amyjet.com
會(huì)員1.png)
