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小鼠ELISA試劑盒測(cè)IgE抗體問(wèn)題分析

時(shí)間:2013-8-5閱讀:347
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用間接小鼠ELISA試劑盒測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽(yáng)性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)不等,用的是*標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過(guò)氧化物酶??墒墙Y(jié)果除了空白對(duì)照孔沒(méi)有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?
可能原因如下:
(1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔,充分洗滌。
(3) 移液頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
(4) 酶標(biāo)板靈敏度過(guò)高。
(5) 一抗顯色時(shí)間的控制等等,關(guān)于小鼠ELISA試劑盒的每一步都要注意才行。

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