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當(dāng)前位置:上海滬鼎生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>人乙型肝炎病毒前S2抗體ELISA試劑盒操作步驟
昨日,上海復(fù)旦大學(xué)李老師向我司錢(qián)咨詢(xún)了一個(gè)人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒,在咨詢(xún)的過(guò)程中,李老師問(wèn)了一些關(guān)于人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒的問(wèn)題,其中就有問(wèn)到那個(gè)操作步驟,我司錢(qián)為李老師講解了,感謝李老師對(duì)我司的大力支持,下面是我司錢(qián)為李老師講解的實(shí)驗(yàn)操作步驟:
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
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