ELISA診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過(guò)渡。由于歷史的原因，人們往往以反應(yīng)本底的好壞來(lái)衡量ELISA反應(yīng)試劑盒，因此有些廠(chǎng)家為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被，該類(lèi)試劑盒的流行病學(xué)敏感度不夠，穩(wěn)定性也成問(wèn)題。
     
    也有廠(chǎng)家堅(jiān)持試劑盒高的流行病學(xué)敏感度，科學(xué)地對(duì)待反應(yīng)結(jié)果?；蚬こ炭乖^合成肽抗原有*的*性，就HCV-ELISA試劑盒來(lái)講，代產(chǎn)品為合成肽抗原，主要是HCV 特異性抗原決定簇的肽片段;第二代產(chǎn)品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽，只是當(dāng)時(shí)的基因工程抗原不全，僅包括了HCV的核心區(qū)片段;第三代產(chǎn)品基本上采用了基因工程抗原，而且這些抗原包括更多、更穩(wěn)定、純度更高的HCV特異性抗原。第三代試劑的敏感度大大提高了。
       
基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別如下：
    基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或 酵母 菌為表達(dá)系統(tǒng)。該類(lèi)抗原與合成肽相比具有以下特點(diǎn)：
·分子量大
    合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸;而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
·穩(wěn)定性好
    包被的抗原的穩(wěn)定性可使 試劑 盒的效期得到保證，早期以合成肽為包被抗原的 試劑 盒效期只有3-4 個(gè)月，采用基因工程抗原后效期大大延長(zhǎng)了。
·基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高 試劑 盒的靈敏度，提高檢出率。
·純化難度大
    基因工程抗原的純化技術(shù)難度較大。
    合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特點(diǎn)：① 分子量太??；② 一般只含有一個(gè)抗原決定簇；③ 純度高；④ 穩(wěn)定性差。
          
    國(guó)內(nèi)乙肝兩對(duì)半試劑廠(chǎng)家較多；不同廠(chǎng)家出產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在一定的差別，資料顯示，不同廠(chǎng)家試劑的特異性和敏感性分別為89.4%—99.3%,78%—89%存在較大差異。有的廠(chǎng)家酶標(biāo)板孔間A值差大于15%；標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定比較差。使用質(zhì)劣的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。因此。選擇高質(zhì)量的試劑是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵之一。