當(dāng)前位置:上海滬鼎生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>上海滬鼎教您如何巧妙利用血清培養(yǎng)細(xì)胞?
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中,血清是常見的科研試劑之一,常見的血清種屬有人的和動物兩種,而動物的又分為牛、豬、雞、羊等,根據(jù)客戶對產(chǎn)品種屬與來源的選擇,價格也是不同的。對于實(shí)驗(yàn)新手來說,稍有不慎就會影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至讓花費(fèi)幾千元買來的血清失去效果。那么我們要如何正確的使用與操作呢?今天上海滬鼎與您探討“如何巧妙利用血清培養(yǎng)細(xì)胞”。
我們今天要說的血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)采用的是貼塊法,這種方法具有獲得平滑肌細(xì)胞純度高,量多,操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。但用貼塊法易使平滑肌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)肌絲喪失,亞細(xì)胞器增加。
操作方法:動物經(jīng)頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開血管,刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層,切成約1mm寬的小條,浸泡在含血清的Hank's液中,并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱,2h左右,取出培養(yǎng)瓶加入20%胎牛血清的培養(yǎng)液,再放回培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)4天。4天后可見細(xì)胞從組織中遷移游出。
在這方法中,大家可要注意啦!不同動物血管結(jié)構(gòu)有差異,豬和猴較易操作,但小動物如兔、鼠因其血管小,血管壁薄等特點(diǎn),使之難以分離。另外組織塊太薄,不易粘附培養(yǎng)基,也使細(xì)胞較難生長。
上海滬鼎特別提示,實(shí)驗(yàn)中請注意:
1. 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種屬加入適量的不同血清,一般可加入胎牛血清,若小牛血清增殖效果差,應(yīng)加胎牛血清(FBS),通常濃度為10%~20%。
2. 培養(yǎng)基的選擇:常用的有DMEM,M199培養(yǎng)基。培養(yǎng)兔的平滑肌細(xì)胞用DMEM效果較好。
3. 種植組織塊的數(shù)目,如75cm2的長頸瓶組織塊不得少于30。
上海滬鼎始終以滿足用戶需求為宗旨,誠心聆聽用戶的需要與批評,作為不斷改進(jìn)的動力,為用戶提供及時周到的銷售與技術(shù)服務(wù)。公司堅(jiān)持從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案、試劑選購、、裝配、檢驗(yàn)、包裝、運(yùn)輸、直到售后服務(wù)做好質(zhì)量保證,就是要讓所有新老客戶 “付有所值”,以合理的價位得到的產(chǎn)品,這是對您選擇上海滬鼎真誠的回報。上海滬鼎真誠的希望與國內(nèi)外同仁攜手合作,為推動我國科研事業(yè)迅猛發(fā)展做出貢獻(xiàn)。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。