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人T淋巴細胞亞群(CD3,CD4,CD8)ELISA試劑盒原理

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更新時間:2024-03-20 20:05:24瀏覽次數(shù):294次

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人T淋巴細胞亞群(CD3,CD4,CD8)ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人T淋巴細胞亞群(CD3,CD4,CD8)的含量。

Elisa試劑盒詳細資料

中文名稱:人T淋巴細胞亞群(CD3,CD4,CD8)ELISA試劑盒原理??

組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。

規(guī)    格:96T/48T

性    狀:液體

保    存:2-8℃

有 效 期:6個月

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

類型
  ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:

捕獲包被法測抗體

  IgM抗體的檢測用于傳染病的早期診斷中。間接法ELISA一般僅適用于檢測總抗體或IgG抗體。如用抗原包被的間接法直接測定IgM抗體,因標本中一般同時存在較高濃度的IgG抗體,后者將競爭結(jié)合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結(jié)合到固相上。因此如用抗人IgM作為二抗,間接測定IgM抗體,必須先將標本用A蛋白或抗IgG抗體處理,以除去IgG的干擾。在臨床檢驗中測定抗體IgM時多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相,以捕獲血清標本中的IgM(其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后加入抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶標記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標本中的IgM成正相關(guān)。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒(HAV)抗體的檢測模式見圖。
  類風濕因子(RF)同樣能干擾捕獲包被法測定IgM抗體,導致假陽性反應(yīng)。因此中和IgG的間接法近來頗受青睞,用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。

說明

1.檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法

2.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。

3.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

4.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。

5.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

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