兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1/CCL2/MCAF）免疫組化試劑盒   。
該試劑盒以HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRP Streptavidin Conjugate，
HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗體 抗原。該試劑盒具有靈
敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的 一抗與相應(yīng)靶抗原
結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，zui后加入HRP-SA，形成抗原—特異
一抗—*化二抗—HRP-SA 復(fù)合物，顯微鏡下觀(guān)察成像。
兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1/CCL2/MCAF）免疫組化試劑盒 ，試劑盒所含試劑：
試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（選用）
試劑B 封閉緩沖液（封閉用） 20 mL
試劑C （*分裝）已稀釋的即用型p38 一抗（2.5ml）
試劑D （*分裝）*化羊抗兔IgG 1 支
（濃度1.5 mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）100 μL+抗體稀釋液20ml
試劑E HRP-SA 復(fù)合物1 支（濃度1 μM，稀釋比1:50~1:200）100 μL
試劑F DAB 顯色液 5 ml
用戶(hù)自備試劑：
1． 10mM TBS（pH7.2~7.4）
三羥基氨基甲烷1.21g

加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH 值至7.2~7.4，zui后定容至1000mL
TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%體積比）
2．抗原修復(fù)液（依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）
10mM pH6.0 檸檬酸緩沖液
檸檬酸0.38g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH 值至6.0，zui后定容至1000mL
或：0.5M EDTA 修復(fù)液（pH8.0）
EDTA·2H2O 186.1g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水700mL，用10mM NaOH 調(diào)pH 值至8.0，zui后定容至1000Ml
3. 緩沖甘油封固劑10 mL
4. Tween 20 5 mL
石蠟包埋組織切片免疫染色
實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%
乙醇2 min；75%乙醇2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)*方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進(jìn)入第5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育
30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min；
12.加HRP-SA： 滴加用試劑C 稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM），37
℃濕盒中孵育30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用DAB 溶液（試劑F）顯色；
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀(guān)察成像： 顯微鏡下觀(guān)察成像。
注意事項(xiàng)：
1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來(lái)水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致
結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使
用。
3. 若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會(huì)
影響結(jié)果觀(guān)察。
5. 如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封
片。
附1：
 ，抗原修復(fù)方法
常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修復(fù)液（pH8.0 或
9.0）等等。
一、酶消化修復(fù)法
切片脫蠟水化處理，TBS 沖洗，在組織上滴加*或*，37℃孵育
20~30min 后TBS 沖洗即可。
二、微波抗原修復(fù)法
微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料
切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或高檔繼續(xù)微波10~15min，取出微波
盒冷卻至室溫后，自來(lái)水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，
須自行調(diào)整。
三、直接高壓抗原修復(fù)法
取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)
液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min 即可脫離熱源，自
然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。
四、隔水式高壓抗原修復(fù)法
不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸
騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)
4~8 min 即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗，取出切片。此方法適用
于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。            

YS02436BRabbit monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF Elisa試劑盒

YS02437B兔子促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）免疫組化試劑盒rabbit adrencocorticotropic hormone,ACTH Elisa試劑盒

YS02438B兔子促卵泡素（FSH）免疫組化試劑盒rabbit follicle-stimulating hormone,FSH Elisa試劑盒 

YS02439B兔子促甲狀腺素（TSH）免疫組化試劑盒rabbit Thyroid Stimulating Hormone,TSH Elisa試劑盒 

YS02440B兔子雌二醇（E2）免疫組化試劑盒rabbit Estradiol,E2 Elisa試劑盒

YS02441B兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP）免疫組化試劑盒rabbit intestinal fatty acid binding protein,iFABP Elisa試劑盒 

YS02442B兔子表皮生長(zhǎng)因子（EGF）免疫組化試劑盒Rabbit Epidermal growth factor,EGF Elisa試劑盒 

YS02443B兔子白血病抑制因子受體（LIFR）免疫組化試劑盒rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR Elisa試劑盒 

YS02444B兔子白三烯B4（LTB4）免疫組化試劑盒rabbit Leukotriene B4,LT-B4 Elisa試劑盒