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免疫組化試劑盒的定義

時間:2014/11/28閱讀:604
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免疫組化試劑盒用于體外診斷。Histostain®-Plus試劑盒用于檢測與人體組織或細胞標(biāo)本。免疫組化試劑盒適用范圍為冰凍切片和石蠟包埋組織切片,新準(zhǔn)備好的淋巴細胞,和固定的培養(yǎng)細胞。

六大特點:

1.簡易:以簡單的一步反應(yīng)取代常規(guī)法的五個步驟。

2.快捷:以1個小時取代常規(guī)法的3-5 個小時。

3.通用:適合于絕大多數(shù)一級抗體,而且不需要二級抗體反應(yīng)。

4.靈敏:具有與常規(guī)法相似的靈敏度。

5.重現(xiàn)性好:實驗結(jié)果重現(xiàn)性好。

6.經(jīng)濟:抗體和試劑可重復(fù)使用 4-5次。

SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法。在實際實驗過程中,其比直接酶標(biāo)二抗敏感5-10倍,是免疫組化的理想方法。

基本原理:SABC是鏈霉親和素-*-酶(或者FITC)復(fù)合物。親和素(Avidin)存在于雞蛋中,分子量67001,是一種堿性蛋白。對*有很強的結(jié)合力。鏈霉親和素是從鏈霉菌中提取的一種蛋白質(zhì),分子量47000,等電點為6.0-6.5,也對*有很強的結(jié)合力,但其等電點接近中性,明顯消除了原堿性蛋白所引起的非特異性吸附。*活化后,可以標(biāo)記抗體和酶而不影響其活性。再經(jīng)SABC放大,一分子的抗體可以結(jié)合幾十分子的酶或者熒光素,從而有很強的放大作用。為了與一抗更好的配合,為了大家實驗的方便,索萊寶公司特進口分裝國外的SABC試劑盒,其包括過氧化物酶,堿性磷酸酶和FITC三大系列,配以其他相關(guān)試劑,可以滿足大部分免疫組化的工作需要。SABC試劑盒可按一抗種屬來源(小鼠、兔、山羊)和顯色方法(DAB、BCIP/NBT、FITC)來分。

試驗原理:被石蠟包埋的組織切片在二甲苯中脫去石蠟并逐級水化后,進行內(nèi)源性的過氧化物酶淬滅。內(nèi)源性過氧化物酶可以被甲醇或Zymed'sPeroxo-Block(目錄號:00-2015)中的3%的過氧化氫所抑制。

說明:非免疫血清用來去除非特異性背景。孵育一抗后,加入二抗,再經(jīng)過一步?jīng)_洗,加入鏈霉親和素過氧化物酶藕聯(lián)物。

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