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人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa試劑盒

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更新時間:2018-01-14 22:03:24瀏覽次數(shù):177次

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人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa試劑盒實驗原理: 用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經(jīng) 過*洗滌后用底物(TMB)顯色。

我公司經(jīng)營的ELISA試劑盒主要是進口原裝的試劑盒,種類齊全,價格實惠,在我公司購買產(chǎn)品,方可免費實驗代測。試劑盒主要是48人份關于試劑盒的其他信息可以來電索要說明書,或者在線咨詢銷售人員。

中文名稱:人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa試劑盒

英文名稱Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF elisa kit

操作程序:

加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干

加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液

ELISA檢測儀測定OD

人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa試劑盒顯色的重要性

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產(chǎn)物用酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。

TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。

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