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微生物菌種如何真空冷凍干燥保存
①準(zhǔn)備安培管
用于真空冷凍菌種保藏的安培管宜采用中性玻璃制造,形狀可用長(zhǎng)頸球形底的,亦稱淚滴型安培管。大小要求外徑6~7.5mm,長(zhǎng)105 mm,球部直徑9~11 mm,壁厚0.6~1.2 mm,也可用沒(méi)有球部的管
②準(zhǔn)備菌種
用真空冷凍干燥法保藏的菌種保藏期可長(zhǎng)達(dá)幾年甚至幾十年,為了不出現(xiàn)差錯(cuò),所用菌種純度要高,而且菌齡要適宜。細(xì)菌和酵母菌的菌齡要求超過(guò)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,若用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種進(jìn)行保藏,其存活期反而降低。一般細(xì)菌的菌齡要求24~48h;酵母菌為3d;形成孢子的微生物則宜保藏孢子;放線菌和絲狀真菌菌齡為7~10d。
③制備菌懸液與分裝
以細(xì)菌斜面為例,用脫脂牛乳2mL左右加入試管中,制成濃菌液,每支安培管分裝0.2mL。
狀安培管。塞好棉塞,在壓力0.11MPa,溫度121℃條件下滅菌30min后備用。
④冷凍
微生物菌種用凍干機(jī),上海拓紛有成套的裝置出售,可直接真空冷凍干燥(直接在凍干機(jī)內(nèi)原位干燥,④和⑤步驟結(jié)合)。
此處介紹的是簡(jiǎn)易的方法與裝置,可達(dá)到同樣的目的。
⑤真空干燥
為在真空干燥時(shí)使樣品保持凍結(jié)狀態(tài),需準(zhǔn)備冷凍槽,槽內(nèi)放碎冰和食鹽,混合均勻,可冷至-15℃。安培瓶冷凍槽的干燥瓶?jī)?nèi)。
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