ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反響為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反響與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。因為抗原、抗體的反響在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每參加一種試劑孵育后，可經(jīng)過洗刷除掉剩余的游離反響物，然后確保實驗成果的特異性與穩(wěn)定性。在實踐應(yīng)用中，經(jīng)過不同的規(guī)劃，詳細(xì)的辦法過程可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA試劑盒間接法。 
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml，4℃。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗刷緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗刷，下同）。
2. 加樣：加必定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中，置37℃孵育1小時。然后洗刷。（一起做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反響孔中ELISA試劑盒參加新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗刷。
4. 加底物液顯色：于各反響孔中參加暫時制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 停止反響：于各反響孔中參加2M硫酸0.05ml。
6. ELISA試劑盒成果斷定：可于白色布景上，直接用肉眼調(diào)查成果：反響孔內(nèi)色彩越深，陽性程度越強，陰性反響為無色或極淺，依據(jù)所呈色彩的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)則的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。