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閱讀:126發(fā)布時(shí)間:2017-4-20
討論豬ELISA Kit白介素的標(biāo)本請求
豬ELISA Kit白介素敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的試驗(yàn)診斷辦法,試劑安穩(wěn)、易保留,操作簡潔,成果判別較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
豬ELISA Kit白介素(IL-17)標(biāo)本請求:
1.標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行獲取,獲取按有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,獲取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保留,但應(yīng)防止重復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 按捺辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
豬ELISA Kit白介素操作過程:
1. 規(guī)范品的稀釋:本試劑盒供給原倍規(guī)范品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
20 ng/L 5 號規(guī)范品 150μl 的原倍規(guī)范品參加150μl 規(guī)范品稀釋液
10 ng/L 4 號規(guī)范品 150μl 的5 號規(guī)范品參加150μl 規(guī)范品稀釋液
5 ng/L 3 號規(guī)范品 150μl 的4 號規(guī)范品參加150μl 規(guī)范品稀釋液
2.5 ng/L 2 號規(guī)范品 150μl 的3 號規(guī)范品參加150μl 規(guī)范品稀釋液
1.25 ng/L 1 號規(guī)范品 150μl 的2 號規(guī)范品參加150μl 規(guī)范品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作一樣)、規(guī)范孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上規(guī)范品加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終究稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗刷液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗刷:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔參加酶標(biāo)試劑50μl,空白孔在外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗刷:操作同5。
9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序丈量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加停止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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