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閱讀:89發(fā)布時(shí)間:2017-10-25
抗體由于性質(zhì)和所運(yùn)用的儲(chǔ)存條件不同,其存儲(chǔ)的“保質(zhì)期”可能從幾周到幾年不等。盡管每個(gè)抗體存儲(chǔ)的條件是一同的,但仍是可以總結(jié)出一些關(guān)于抗體存儲(chǔ)建議和一般準(zhǔn)則。
一:低溫對(duì)抗體的保存至關(guān)重要
一般來說,抗體存放在≤4℃的清潔,滅菌的玻璃或塑料管。儲(chǔ)存在室溫下一般會(huì)由于微生物的生長(zhǎng)導(dǎo)致抗體退化和/或失活。抗體儲(chǔ)存液放在4℃環(huán)境中1天或許幾周內(nèi)其活性不會(huì)遭到明顯影響。別的,抗體中可以參與終濃度為50%的甘油或乙二醇儲(chǔ)存于-20℃。一般我們?yōu)榱朔乐怪貜?fù)凍融,可以分裝抗體。還可以參與抗微生物藥物(如*或硫柳汞)以防止微生物的生長(zhǎng)。帶有符號(hào)的抗體一般可以在甘油或乙二醇中于-20℃保存1-2年。但是,在冷凍保護(hù)劑的污染物可能會(huì)影響酶的活性。
一些研究人員發(fā)現(xiàn)多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性丟掉不大。但是,一旦抗體被純化后,儲(chǔ)存在50%的甘油中于-20℃保存,即便沒有凍融,其活性的丟掉也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。單克隆抗體可以用兩種辦法保存:*,保存在50%的甘油存放于-20℃;第二,也是比較好的辦法,將其保存在豐滿硫酸銨于4℃或-20℃(4℃更好)保存。在大多數(shù)情況下,凍干的抗體是存放在-20℃。
二:向抗體儲(chǔ)存液中參與抗氧化劑是防止抗體因氧化失效的關(guān)鍵步驟
氧化反應(yīng)是某些酶,尤其是巰基酶的一同問題。為了防止氧化反應(yīng)對(duì)抗體的損壞,我們可以向抗體中參與一些還原劑(如二硫蘇糖醇(DTT)或 巰基乙醇(2-ME))。實(shí)驗(yàn)證明:越高的pH環(huán)境和溫度,有酶活性的抗體的保存時(shí)間越短。此外,參與0.1mM的銅離子,其氧化率添加;而參與金屬螯合劑EDTA可添加有效期。
三:蛋白質(zhì)安穩(wěn)劑和抗生素對(duì)抗體的安穩(wěn)儲(chǔ)存發(fā)揮著重要作用
蛋白質(zhì)安穩(wěn)劑可以延伸大多數(shù)蛋白質(zhì)在4℃或-20℃的保質(zhì)期。而25-50%的甘油或乙二醇等防凍劑有助于安穩(wěn)抗體,防止在-20℃環(huán)境中構(gòu)成冰晶,防止其損壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。蛋白酶克制劑的參與可以防止抗體發(fā)生水解反應(yīng)導(dǎo)致其失活。而抗微生物藥物,如終究濃度在0.02-0.05%(W / V)的*(NaN3的)或終濃度為0.01%(W / V)的硫柳汞可以克制微生物的生長(zhǎng)。
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