細胞培養(yǎng)基種類與基本成分
培養(yǎng)基種類
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
其具體的特征及應(yīng)用如下:
1、BME細胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設(shè)計,BSS+12種氨
基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎(chǔ)上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DME、IMDM等。
2、MEM細胞培養(yǎng)基又稱*Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種基本、試用范圍培養(yǎng)基,但因其營養(yǎng)成分所限,針對之特定細胞培養(yǎng)與表達時,并不一定是使用效果培養(yǎng)基。
3、DMEM細胞培養(yǎng)基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養(yǎng)基Guilber和Iscove將Dulbecco' Medium改良為Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS
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