進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規(guī)程,最da程度地降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn)。
劃分操作區(qū):目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現(xiàn)wan全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,均要求實驗操作在三個不同的區(qū)域內(nèi)進行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進行:
(1)標本處理區(qū),包括擴增摸板的制備。
(2)擴增區(qū),包括反應液的配制和PCR擴增。
(3)產(chǎn)物分析區(qū),凝膠電泳分析,產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備。
(4)各工作區(qū)要有一定的隔離,操作器材專用,要有一定的方向性。如:標本制備→PCR擴增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。
切記:產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個工作區(qū)。
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