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ELISA試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
菌種
科研細(xì)胞
PCR檢測(cè)試劑盒
感覺態(tài)細(xì)胞
血清
elisa檢測(cè)試劑盒
PCR相關(guān)試劑
酶聯(lián)免疫試劑盒
抗體
細(xì)胞系

N-端腦利鈉肽前體檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

時(shí)間:2019-12-30閱讀:218
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N-端腦利鈉肽前體檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。

驗(yàn),可將標(biāo)本放于20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50%l。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測(cè)樣品 10%l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50%l,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. N-端腦利鈉肽前體檢測(cè)試劑盒測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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