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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>> 50次元胡LAMP鑒定試劑盒
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2.靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
4.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
5.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 元胡LAMP鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Rhizoma corydalis |
規(guī)格 | 50次 |
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
用于鑒別耐的弧菌對(duì)杞櫞酸鹽和無機(jī)銨的利用能力。(鑒定霍亂弧菌) 1%NaCl西蒙氏杞櫞酸鹽生化鑒定管 20支/盒
用于鑒別耐的弧菌利用糖源的能力。 1%NaCl蔗糖生化鑒定管 20支/盒
用于樣品的稀釋。(GB 4789.13-2010) 1%蛋白胨水 250g
用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng)(2010版中國藥典) 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 250g
用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng) 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 100g
每支添加于1000mL的1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基(021105)中. 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基配套試劑 10支/盒
用于苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn). 10% FeCl3試劑(苯丙氨酸試劑) 10ml/支
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 10%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 10%胰蛋白胨大豆肉湯 90mmX20個(gè)
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 10%胰蛋白胨大豆肉湯 225ml/X10袋
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)(GB/T4789.10-2008)。 10%胰酪胨大豆肉湯 250g
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 11%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 2%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
嗜二氧化碳菌培養(yǎng):每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5LCO2產(chǎn)氣劑 10袋/包
使用2.5L厭氧產(chǎn)氣劑一袋;可裝12個(gè)培養(yǎng)皿。 2.5L密封培養(yǎng)灌 19.7x13.5x9.5cm
元胡LAMP鑒定試劑盒微需氧菌培養(yǎng):每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5L微需氧產(chǎn)氣劑 10袋/包
嚴(yán)格厭氧菌培養(yǎng):每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5L厭氧產(chǎn)氣劑 10袋/包
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
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