elisa檢測(cè)試劑盒平端連接要求的條件：
1、低濃度（0.5mmol/L）的ATP(Ferretti和Sgaranekka，1981）。
2、不存在亞精胺一類的多胺。
3、*濃度的連接酶（50Weiss單位．ml）。
4、高濃度的平端。
平端DNA連接缺點(diǎn)：
1、連接效率比粘性末端低：連接效率之所以比較低，原因之一是在連接過程中只有連接酶的作用，缺乏粘性末端那樣突出堿基的互補(bǔ)作用；原因之二是常用的T4DNAligase對(duì)于平末端的Km值比粘性末端高1000倍。
2、可能產(chǎn)生雙向插入：由于平端連接的末端沒有特異性，連接的時(shí)候不能定向，所以兩種方向的插入都有可能。這個(gè)時(shí)候就需要有一種有效的鑒定方法。一般分別在載體和目的片段選擇一個(gè)酶切位點(diǎn)進(jìn)行酶切鑒定，當(dāng)然，具體的鑒定方法要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)而定。
3、可能多拷貝插入：平端連接時(shí)，可能目的片段多個(gè)插入，并且在多個(gè)插入的時(shí)候還有可能每個(gè)插入子以不同方向連接，導(dǎo)致有時(shí)候結(jié)果難以解釋。一般目的片段越大，多拷貝插入的可能就越小。
elisa檢測(cè)試劑盒平端DNA連接優(yōu)點(diǎn)：
1、沒有連不上的，只有切不開的。平末端連接不牽扯到粘性末端的堿基突出問題，所以，理論上任何兩條DNA序列都能連接在一起，當(dāng)然需要ligase的酶學(xué)作用。這個(gè)不同DNA分子之間的連接帶來了極大地便利，因?yàn)槠侥┒俗匀皇沁@樣，而如果遇到5‘或者3’突出的粘性末端，也可以經(jīng)過處理成為平末端。
2、有時(shí)候，兩個(gè)平末端連接在一起以后，可以產(chǎn)生另一種內(nèi)切酶的識(shí)別序列，為后續(xù)的克隆工作提供了一種機(jī)會(huì)。
2-羥基咔唑    號(hào)：    86-79-3
硫氫化鈉，水合    號(hào)：    207683-19-0
6-嗎啉煙酰氯    號(hào)：    313350-36-6
4-(三氟甲基)芐胺    號(hào)：    3300-51-4
2,4,6-三氟吡啶    號(hào)：    3512-17-2
5-溴戊酰氯    號(hào)：    4509-90-4
1-(3-氨基丙基)咪唑    號(hào)：    5036-48-6
2-溴丙酰氯    號(hào)：    7148-74-5
N-(3'-丙胺基)-2-吡咯烷酮    號(hào)：    7663-77-6
Α,4-二溴苯乙酸乙酯,98%    號(hào)：    77143-76-1
4-(三氟甲氧基)苯磺酰氯    號(hào)：    94108-56-2
2-(三氟甲氧基)苯磺酰氯    號(hào)：    103008-51-1
4-苯氧基芐胺    號(hào)：    107622-80-0
雙（2-甲氧乙基）胺    號(hào)：    111-95-5
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