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PCR檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

時間:2021/1/13閱讀:569
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 PCR檢測試劑盒檢測原理:

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 PCR檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 PCR檢測試劑盒試劑盒性能:

1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

2.  靈敏度:檢測范圍0.1-8ng/ml,檢測濃度小于0.1 ng/mL。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4.  重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6個月

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