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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司資料大小
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215次elisa檢測(cè)試劑盒樣本收集及保存紀(jì)寧生物提幾點(diǎn)建議:
1.嚴(yán)重溶血,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽(yáng)性;
2.混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng):
3.標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;
4.采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
實(shí)驗(yàn)需求留意問(wèn)題
1.樣品稀釋
一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均經(jīng)過(guò)很多實(shí)驗(yàn)斷定,以確保實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反響是一種敏感性很高的反響,如果血清不稀釋,不行防止會(huì)發(fā)生很強(qiáng)的非特異性反響,呈現(xiàn)假陽(yáng)性.
2.試劑盒平衡
Elisa中一切試劑和板條均應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時(shí)刻太短會(huì)形成試劑混勻不行,樣品孵育時(shí)刻相對(duì)縮短,ELISA反響不行充沛.冬天室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.
3.顯色
顯色必定要操控時(shí)刻,依據(jù)試劑盒闡明操作即可.一般來(lái)說(shuō),顯色時(shí)刻過(guò)短,成果偏低;顯色時(shí)刻過(guò)長(zhǎng),空白增高或許非特異性顯色添加.
4.比色
比色要留意波長(zhǎng)的挑選.以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需依據(jù)要求隨時(shí)替換.因而,簡(jiǎn)單呈現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問(wèn)題.
5.樣品和試劑的混勻
在稀釋前、后的樣品有必要充沛混勻,一切試劑在加樣前也須搖勻,以確保實(shí)驗(yàn)的均一性.
6.加樣
加樣是一項(xiàng)很重要的過(guò)程.加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺出和發(fā)生氣泡.加樣太快,無(wú)法確保微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附.
7.溫育
溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定勝敗zui為要害的一個(gè)要素.ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反響在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,有必要在必定的溫度條件下反應(yīng)必定的時(shí)刻.
8.洗板
固相免疫測(cè)定技能是一種非均相免疫測(cè)定技能,需以洗刷操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反響溫育過(guò)程中吸附的非特異成份別離開(kāi)來(lái),以確保ELISA測(cè)定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,必定要大力拍干;及時(shí)替換吸水紙,尤其是拍過(guò)酶標(biāo)記物的吸水紙必定要棄去,不然可能影響實(shí)驗(yàn)成果.
elisa檢測(cè)試劑盒小鼠干燥綜合征抗原B(SSB)ELISA試劑盒 ,英文名: SSB ELISA Kit
小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IP-10/CXCL10 ELISA Kit
小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)ELISA試劑盒 ,英文名: IRF5 ELISA Kit
小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 ,英文名: HL ELISA Kit
小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒 ,英文名: L-FABP ELISA Kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)ELISA試劑盒 ,英文名: HGFAC ELISA Kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒 ,英文名: HGF ELISA Kit
小鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 ,英文名: TG ELISA Kit
小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 ,英文名: MBL ELISA Kit
小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)ELISA試劑盒 ,英文名: CALP ELISA Kit
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒 ,英文名: CCB ELISA Kit
小鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒 ,英文名: CAM ELISA Kit
小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒 ,英文名: CR ELISA Kit
小鼠鈣非依賴(lài)型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 ,英文名: sIgA ELISA Kit
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: sPLA2 ELISA Kit
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 ,英文名: PARC/CCL18 ELISA Kit
elisa檢測(cè)試劑盒
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