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貨號 | BJ-0161115-2 |
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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
貨號:BJ-0161115-2
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅱ系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月
商品介紹:
測定意義: fu酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。 測定原理: 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。 所需的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
脂滴相關蛋白TIP47抗體薩氏艾美耳球蟲人晶狀體上皮*培養(yǎng)基
腫瘤抑制基因Testin抗體平臍蠕孢菌大鼠腦成纖維*培養(yǎng)基
腫瘤血管內(nèi)皮標記相關蛋白質(zhì)7抗體樟疫霉大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
環(huán)指蛋白HCG1抗體彩色豆馬勃大鼠胰腺導管上皮*培養(yǎng)基
三核苷酸重復蛋白6B抗體蘇云金芽孢桿菌大鼠氣管和支氣管上皮*培養(yǎng)基
扭轉蛋白A抗體六孢毛殼人腦靜脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體鹽球菌人腦動脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體榮州假黃單胞菌大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體鹽生鹽古桿菌大鼠腦膜*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體橙磷傘大鼠膀胱平滑肌*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體釀酒酵母人腦成纖維*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體根瘤菌人成骨*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體石頭農(nóng)霉菌小鼠肝動脈平滑肌*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體豐盛毛霉小鼠食管上皮*培養(yǎng)基
磷酸化微管相關蛋白抗體埃里鏈格孢小鼠外周血白*培養(yǎng)基
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法蛋白聚糖(PG)試劑盒Anti-CTCF Antibody磷酸化原癌基因c-Met相關酪an酸激酶
絨毛蛋白(CVL/EZR)試劑盒 Anti-CTBP2 Antibody磷酸化急性髓白血病1蛋白
白介su2(IL-2)試劑盒Anti-CTH AntibodyDNA修復蛋白Rad23
甘露糖凝集su受體(MBLR)試劑盒 Anti-CTLA4 Antibody組織相容性復合物RTF1
周期su依賴性激酶1(CDK1)試劑盒 Anti-CTNNA1 Antibody核糖核苷酸還原酶1
TU3A蛋白(TU3A)試劑盒Anti-CTH Antibody環(huán)指蛋白167
半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)試劑盒 Anti-CTHRC1 Antibody抵抗su
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
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