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三澤鏈霉菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-23 11:46:17瀏覽次數:160次

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三澤鏈霉菌保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,產品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。

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規(guī)格參數:
資源名稱  三澤鏈霉菌保存
種屬: Streptomyces│misawanensis

分離基物: 土壤

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 產生代謝產物具有抑菌活性

培養(yǎng)基: 0012

生長條件: 28℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,產品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
無殼異擔子菌模式菌株:提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Heterobasidion│ecrustosum Tokuda T. Hatt. & Y.C. Dai

環(huán)帶小薄孔菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Antrodiella│zonata (Berk.) Ryvarden

伯克利邦氏孔菌模式菌株:提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Bondarzewia│berkeleyi (Fr.) Bondartsev & Singer

緊密蠟孔菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Ceriporia│spissa (Schwein. ex Fr.) Rajchenb.

肉桂色集毛孔菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Coltricia│cinnamomea (Jacq.) Murrill

多帶革孔菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Funalia│polyzona (Pers.) Niemelä

中國擬迷孔菌安全等級:1提供形式:斜面培養(yǎng)物種屬:Daedaleopsis│sinensis (Lloyd) Y. C. Dai

木蹄層孔菌模式菌株:安全等級:1種屬:Fomes│fomentarius (L.) J. Kickx f.

人白細胞介素29elisa檢測試劑盒

英文名稱:Human IL-29 ELISA KIT

反應性:Human

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:8 pg/ml

檢測目標:IL-29/IFN-lambda 1

應用:Sandwich ELISA
腸炎沙門氏菌現貨,ATCC菌株

蠟樣芽孢桿菌培養(yǎng),ATCC菌株

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成纖維細胞生長因子7(FGF7)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 7 (FGF7)規(guī)格:48T/96T

角蛋白17(KRT17)ELISA Kit for Keratin 17 (KRT17)規(guī)格:48T/96T

白介素2(IL2)ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2)規(guī)格:48T/96T

表面活性物質關聯蛋白J(SPJ)ELISA Kit for Surfactant Associated Protein J (SPJ)規(guī)格:48T/96T

組蛋白H2B(H2B)ELISA Kit for Histone H2B (H2B)規(guī)格:48T/96T

43kDa Tar DNA結合蛋白(TDP43)ELISA Kit for Tar DNA Binding Protein 43kDa (TDP43)規(guī)格:48T/96T

肌鈣蛋白T()ELISA Kit for Troponin T ()規(guī)格:48T/96T

Apelin 13蛋白(AP13)ELISA Kit for Apelin 13 (AP13)規(guī)格:48T/96T

轉化生長因子β1(TGFβ1)ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)規(guī)格:48T/96T

髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1)規(guī)格:48T/96T

基端前腦鈉素(NT-ProBNP)ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP)規(guī)格:48T/96T

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三澤鏈霉菌保存γS-crystallin蛋白抗體Chamaejasmenin C中文名:別名:分子式:C33H28O10

霍亂腸毒素β鏈抗體Eucomol中文名:別名:分子式:C17H16O6

1號染色體開放閱讀框148抗體Trilepisflavan中文名:別名:分子式:C17H18O4

鋅指蛋白47抗體Nepetin中文名:澤蘭黃酮別名:Eupafolin分子式:C16H12O7

鋅指蛋白851抗體Spisin中文名:斯皮諾素別名:分子式:C28H32O15

 

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