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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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糖霉菌保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-22 14:47:02瀏覽次數(shù):184次

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糖霉菌保存低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱(chēng)  糖霉菌保存
種屬: Glycomyces│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 12

生長(zhǎng)條件: 28℃

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
葡萄球菌選擇性瓊脂價(jià)格英文:Staphylococcus Selective Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)  

10%胰酪胨大豆肉湯*英文:10% NaCl Tryptic Soy Broth  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定,增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))  

營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面價(jià)格英文:Nutrient agar slant  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)  

豆粉瓊脂說(shuō)明書(shū)英文:Blood Agar Base  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于配制血平板  

磷酸鹽緩沖液(pH7.2)說(shuō)明書(shū)英文:PBS broth  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于樣品的稀釋  

含225ml7.5%肉湯均質(zhì)袋供應(yīng)英文:產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包  產(chǎn)品用途:用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養(yǎng)  

革蘭氏染色液供應(yīng)英文:Gram Staining  產(chǎn)品規(guī)格:5ml*8  產(chǎn)品用途:用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)  

腦心浸液肉湯價(jià)格英文:Brain Heart Infusion Broth  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌  

甲苯胺藍(lán)-DNA酶平板*英文:產(chǎn)品規(guī)格:9cm  產(chǎn)品用途:用于金黃色葡萄球菌核糖酸酶檢測(cè)  

腦心浸出液肉湯(BHI)GB標(biāo)準(zhǔn)*英文:Brain Heart Influsion Broth  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于金黃色葡萄球菌的純化培養(yǎng)  

腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基(不含瓊脂)供應(yīng)英文:Enterotoxin Toxigenic Medium  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于金黃色葡萄球菌腸毒素產(chǎn)毒試驗(yàn)  

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2elisa檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng):Rat TGF-β-2 ELISA KIT

反應(yīng)性:Rat

樣品類(lèi)型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:4 pg/ml

檢測(cè)目標(biāo):TGF-β-2

應(yīng)用:Sandwich ELISA
棒桿菌屬 Corynebacterium sp.

乳酸片球菌 PediococcusacidilacticiLindner

膠凍樣類(lèi)芽孢桿菌 Paenibacillus mucilaginosus

腸產(chǎn)毒性大腸埃希氏菌 Escherichia coli ETEC

腸致病性大腸埃希氏菌 Escherichia coli EPEC

英諾克李斯特氏菌 Listeria innocua

馬紅球菌 Rhodococcus equi

納豆芽孢桿菌 Bacillus natto

腸侵襲性大腸埃希氏菌 Escherichia coli EIEC

伊氏李斯特氏菌 Listeria ivanovii

山梨醇麥康凱瓊平板10塊Sorbitol Maconkey Agar Plate

麥康凱瓊平板50塊MacC Agar Plate大腸菌群及大腸桿菌分離

雙洗瓊平板10塊雙洗瓊平板

V-P試劑盒(、抗性染液)10毫升×2V-P Reagent(A、B)細(xì)菌V-P試驗(yàn)

500毫升×4

結(jié)核冷染液70毫升×3結(jié)核冷染液

選擇性巧克力平板10塊Selectivity chocolate Plate

改良淋病奈瑟菌選擇性瓊平板10塊改良淋病奈瑟菌選擇性瓊平板

革蘭氏染液(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)/Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)50毫升×4Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)細(xì)菌革蘭氏染色

250毫升×4

Fraser添加劑10毫升Fraser Supplement添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)

UVM添加劑10毫升UVM Supplement添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
糖霉菌保存通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體1-Hydroxy-N-methylacridone中文名:1-羥基-N-甲基吖啶酮?jiǎng)e名:1-Hydroxy-10-methylacridone分子式:C14H11NO2

激活素受體1B抗體Epicorynoxidine中文名:別名:分子式:C21H25NO5

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體Nicotine 1'-N-oxide中文名:別名:(S,S)-Nicotine 1'-N-oxide; Oxynicotine分子式:C10H14N2O

胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體6α-Hydroxylycopodine中文名:6α-羥基石松堿別名:Alkaloid L.20分子式:C16H25NO2

載脂蛋白A1抗體Anatabine中文名:新煙草堿別名:(S)-Anatabine分子式:C10H12N2
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線(xiàn)分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線(xiàn)稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀(guān)察菌落特征的目的,但平板劃線(xiàn)分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

 

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