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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR基因檢測(cè)試劑盒>>GMO轉(zhuǎn)基因元件檢測(cè)>> 50次轉(zhuǎn)基因元件FMV35S啟動(dòng)子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件tOCS探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件泛素基因啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件泛素基因啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
【運(yùn)輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購(gòu)本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽(yáng)性對(duì)照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。 ?
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號(hào) | BJP7043 |
訂購(gòu)流程:
通過(guò)在線(xiàn)客服咨詢(xún)產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽(yáng)性對(duì)照:有典型S型擴(kuò)增曲線(xiàn)或Ct值≤35。
(2)陰性對(duì)照:Ct值>38或無(wú)Ct值,線(xiàn)形為直線(xiàn)或輕微斜線(xiàn),無(wú)指數(shù)增長(zhǎng)期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽(yáng)性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,則判定為陽(yáng)性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無(wú)Ct值。
CHRNB2 英文名稱(chēng): 型乙酰膽堿受體B2抗體 0.2ml
Anti-CDK6 周期素依賴(lài)性激酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NO(Nitric Oxide )human 一氧化氮(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CRHR2/CRFR2 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NKB 神經(jīng)激肽B抗體 規(guī)格 0.2ml
Human orosomucoid,ORM ELISA Kit 人類(lèi)粘蛋白 96T
Tex14 英文名稱(chēng): 癌/抗原113抗體 0.2ml
APH1a 英文名稱(chēng): 早老素γ分泌酶抗體 0.2ml
Anti-Urocortin 新型血管活性因子UCN抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PTHrP ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-VPS18 空泡分選蛋白18抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCDFP15 特異性囊腫病液體蛋白15抗體 規(guī)格 0.2ml
ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化素A 96T
Phospho-NFKBIA (Tyr42) 英文名稱(chēng): 磷酸化IKB α抗體 0.1ml
轉(zhuǎn)基因元件FMV35S啟動(dòng)子探針?lè)╭PCR試劑盒組織超氧化物陰離子熒光法定量檢測(cè)試劑盒FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原C31H48O7
組織超長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒Mouse Haptoglobin ELISA KITC36H60O8
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒Mouse Angiopoietin-2 ELISA KitC16H12O5
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒Mouse IL-8 ELISA KitC21H20O12
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒Mouse ALCAM ELISA KitC15H10O4
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2(VEGFR2, Flk-1)—ELISA kitC27H30O14
組織單胺氧化酶(MAO)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒Human Vascuolar cell adhesion molecule 1 ELISA kitC30H48O6
組織單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒Human TRAIL R4 ELISA KITC8H10O3
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