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大腸埃希氏菌說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-24 11:29:37瀏覽次數(shù):152次

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大腸埃希氏菌說明書低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  大腸埃希氏菌說明書
種屬: Escherichia│coli

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 33

生長條件: 37℃

存儲條件: 真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
 Hexylresorcil

人類成纖維細(xì)胞源性皮膚替代參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 Hexylene Glycol

 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: Hexylcaine Hydrochloride

人皮膚參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: Hexobarbital CIII

水楊毒扁豆堿標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 57647 Hexacosal

維生素K1標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 84800 Hexachlorophene

毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 92137 Heptane

鹽毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 54717 Heptamethyl Trisiloxane

哌咪清標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 2062784 Heparin Sodium

心得樂標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 13523869 Halothane

鹽格列酮標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 112529154 Haloperidol Related Compound A

哌西他嗪標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 3819009 Haloperidol Decaate

哌拉西林標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 66258762 Haloperidol

標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 110850 Halobetasol Propionate

己二鹽標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 142881 Halcinide

枸椽標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格: 144296 Halazepam CIV (AS)
鹽氨丙啉(>99%,BP)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>99%,BP純度:≥97%

三氧化二銻(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%

亞鹽(>95%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>95%,BR純度:≥98%

天青C(>50%,BS)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>50%,BS純度:≥97%

鋇(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%

(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%

安息香(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%

二腙(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥94%

化鉍(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥94%

檸檬鉍   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:BR純度:≥98%

化鉍鉀   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:BR純度:鑒別用(80%)

鉍(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%

堿式碳鉍   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:BR純度:≥95%

水楊鉍   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:鉍含量:>56%,BR純度:97%

鉍粒(>99%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%

β氧乙鈉(植物激素級)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:>98%,植物激素級純度:95%

SFR19  剪接因子,精氨/絲氨豐富19    * 0.2ml Carboxymethyl cellulose

SOX11  轉(zhuǎn)錄因子SOX11蛋白一抗    * 0.2ml Fludarabine

SVH/ARMC10  肝癌蛋白剪接變異體蛋白一抗    * 0.2ml Fludarabine

THRSP  狀腺激素反應(yīng)蛋白一抗    * 0.2ml G418 disulfate,Geneticin

TIMM17A  線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶一抗    * 0.2ml Erlotinib

TMEM49  跨膜蛋白49一抗    * 0.2ml NAcetylcysteine

TMS1/ASC  凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC一抗    * 0.2ml Zopiclone

TPD52/Prostate and colon associated protein  前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白    * 0.2ml Zopiclone
大腸埃希氏菌說明書HSkMSC tRNA 人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HSkMM tRNA 人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HRGEC tRNA 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HRPTEpiC tRNA 人腎近曲小管上皮細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HRCEpiC tRNA 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HREpiC tRNA 人腎上皮細(xì)胞總RNA  規(guī)格:

HRMC tRNA 人腎系膜細(xì)胞總RNA  規(guī)格:
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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