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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
1號染色體開放閱讀框95抗體 | C1ORF95 | BJ-K8158 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
RVS Soy Broth人心臟微血管內皮細胞總RNA1,1,1,5,5,5-六氟戊烷-2,4-二酮FLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原
XLD瓊脂人主動脈內皮細胞總RNA1,1,1,5,5,5-六氟戊烷-2,4-二酮FOS B FosB抗原
XLD Agar人主動脈平滑肌細胞總RNA(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-唑烷-2-酮FRA2/FOSL2(Fos related/like aigen 2) FOS樣抗原2
溴棕*銨瓊脂人心肌細胞總RNA(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-唑烷-2-酮FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉頭蛋白F1抗原
Cetrimide Agar Base人心肌細胞-成人總RNA(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-唑烷-2-酮FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原
甘露鹽瓊脂人心臟成纖維細胞總RNA氯化镥(III)六水合物, REactonFoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原
Mannitol Salt Agar人心肌細胞-成人心室總RNA6-溴-2-萘酚FOXM1/HFH 11 peptide 插頭蛋白M1抗原
梭菌強化培養(yǎng)基人心肌細胞-成人心房總RNA6-溴-2-萘酚Measles virus of fusion protein 麻疹病抗原(麻疹病融合蛋白)
Kiss-1/FITC 熒光素標記腫瘤轉移抑制基因IgG纖維素酶D-氨基Rat ENG (Endoglin) 檢測試劑盒
KIF17/FITC 熒光素標記驅動蛋白家族KIF17IgG細胞分裂周期蛋白14B3,5-二乙酰氧基甲酸Rat FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) 檢測試劑盒
PFK2/PFKFB3 /FITC 熒光素標記6磷酸果糖激酶2IgG1號染色體開放閱讀框1773,5-二乙酰氧基甲酸Rat FABP4 (Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte) 檢測試劑盒
Phospho-PFK2 (Ser466) /FITC 熒光素標記磷酸化6磷酸果糖激酶2IgG1號染色體開放閱讀框1833,5-二乙酰氧基甲酸Rat IL-1R2 (Ierleukin 1 Receptor Type II) 檢測試劑盒
KLF2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白2IgG克侖特羅/瘦肉精氯乙烯基鎂Rat IL-1R1 (Ierleukin 1 Receptor Type I) 檢測試劑盒
Klf4/FITC 熒光素標記腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白KIgG6號染色體開放閱讀框1512,2,2-三氟乙烷Rat MCSF (Macrophage Colony Stimulating Factor 1) 檢測試劑盒
KLF5/FITC 熒光素標記腸道內富含的Kruppel樣因子5IgG15號染色體開放閱讀框522,2,2-三氟乙烷Rat IL-22 (Ierleukin 22) 檢測試劑盒
KLF6/FITC 熒光素標記轉染抑癌基因KLF6IgG2號染色體開放閱讀框89并[b]噻吩-2-甲Rat PL (Pancreatic Lipase) 檢測試劑盒
1號染色體開放閱讀框95抗體香栓孔Mouse PCT (Procalcitonin) Kit
耐鹽考克氏Mouse TH (Tyrosine Hydroxylase) Kit
地下鹽單胞Mouse ADM (Adrenomedullin) Kit
蘇云金芽孢桿Mouse APLN (Apin) Kit
殼Mouse CTSB (Cathepsin B) Kit
變粉紅鎖擲孢酵母Mouse SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) Kit
污黑腐皮殼Mouse SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extraclular) Kit
類干酪乳桿Mouse MMP-11 (Matrix Metalloproteinase 11) Kit
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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