規(guī)格參數(shù)：
資源名稱  堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌說(shuō)明書
種屬: Bacillus│firmus

分離基物: 沉積物

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及海洋微生物研

培養(yǎng)基: 0223

生長(zhǎng)條件: 30℃

存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具：
1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平：感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法：
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ：Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃，15min。
傳代方法 ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃，好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法：
①簡(jiǎn)單保存法，產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念：
(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬：菌種的上一級(jí)分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來(lái)長(zhǎng)期保存）資源。
(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結(jié)節(jié)疹病毒LAMP試劑盒英文名稱：MTT Cell Proliferation Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T

發(fā)貨周期：1～3天

本試劑盒以MTT（高純度）作為指示劑，在經(jīng)典操作步驟的基礎(chǔ)上，采用*的甲臜溶解液配方，可以直接溶解甲臜沉淀，無(wú)需去除原有的培養(yǎng)液。從而避免因去除培養(yǎng)液時(shí)甲臜被部分去除而引起的操作誤差。具有本底低，靈敏度高，線性范圍寬，操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。，本試劑盒還提供配套的一次性針頭過(guò)濾器和注射器，為實(shí)驗(yàn)帶來(lái)更多的便利。

噻唑蘭（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑，是一種黃色染料，已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺(tái)盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法，用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞的活力，細(xì)胞增殖以及細(xì)胞毒性分析。檢測(cè)原理在于：MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細(xì)胞膜滲透性?；罴?xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來(lái)，酶標(biāo)儀下測(cè)定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比，用以評(píng)估細(xì)胞存活狀況。

產(chǎn)品組份：

MTT粉末——————25mg

MTT溶劑——————5ml

甲臜溶解液————50ml

除菌套裝—————1包

注意事項(xiàng)

1)甲臜溶解液具有腐蝕性和毒性，使用時(shí)注意防護(hù)。

2)MTT有致癌性，應(yīng)小心操作；MTT溶液需要無(wú)菌，因其對(duì)菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超過(guò)1周，因其可能發(fā)生降解，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤。

3)MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力，但不能測(cè)定細(xì)胞數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT吸光度好在0-0.7范圍內(nèi)。

4)使用微孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間比較長(zhǎng)，需要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一般情況，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，建議棄用周圍一圈的方法，改加PBS，水或者細(xì)胞培養(yǎng)液等。也可通過(guò)將96孔板放在靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的位置，以減緩蒸發(fā)現(xiàn)象。

5)甲臜溶解液低溫或者常溫保存可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混勻后即可使用。

6)為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

儲(chǔ)存條件：4℃，有效期1年

丙酮磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Alternaria spp.交鏈孢霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

丙酮中吡菌磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-PCR試劑盒

丙酮中二溴磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

丙磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒

丙酮中滅菌磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amidostomum anseri鵝裂口線蟲PCR試劑盒

丙酮中毒壤磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amidostomum anseri鵝裂口線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中谷硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amidostomum anseri鵝裂口線蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

丙酮中乙基谷硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolaptosis spp.擬無(wú)枝菌酸菌通用PCR試劑盒

丙酮中乙基溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolaptosis spp.擬無(wú)枝菌酸菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolaptosis spp.擬無(wú)枝菌酸菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

丙酮中溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolata autotrophica自養(yǎng)無(wú)枝酸菌PCR試劑盒

丙酮中苯硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolata autotrophica自養(yǎng)無(wú)枝酸菌染料法熒光定量PCR試劑盒

溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　1mL　Amycolata autotrophica自養(yǎng)無(wú)枝酸菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

土壤QC樣-多環(huán)芳烴（PAH）　30克　Anaplasma centrale 中央無(wú)漿體(無(wú)形體)PCR試劑盒

總余氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　20mL　Anaplasma centrale 中央無(wú)漿體(無(wú)形體)染料法熒光定量PCR試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌說(shuō)明書大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒英文名稱：Rat L-Selectin ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit進(jìn)口/原裝

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒英文名稱：Rat N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit *

大鼠N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit *

人過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒英文名稱：human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA Kit*

人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒英文名稱：Human peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit進(jìn)口/分裝

人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒英文名稱：Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜，對(duì)平板的要求比較高，產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。