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基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
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規(guī)格參數(shù):
資源名稱 戊糖片球菌規(guī)格
種屬: Pediococcus│pentosaceus
分離基物: 發(fā)霉谷子
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 6
生長條件: 24℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
Bovine rovirus(BoV)牛諾如病毒RT-LAMP試劑盒英文名稱:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒各組分均以無菌形式提供,可直接用于細(xì)胞實驗。臺盼藍(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍色染料,可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜,將其染成藍色,而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性,可將臺盼藍排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細(xì)胞(活細(xì)胞呈透明無色)和死細(xì)胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外,臺盼藍(合適濃度)還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
使用方法
1)對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,對其充分清洗后,加入適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液;對于貼壁細(xì)胞,先用胰酶消化細(xì)胞,再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。
2)取0.1ml單細(xì)胞懸液,按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻,室溫染色3~10min。
【注】:因臺盼藍具有細(xì)胞毒性,染色時間過久會導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色,干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計數(shù)板,于顯微鏡低倍鏡下計數(shù),分別計算著色細(xì)胞(即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞)和總細(xì)胞。
【注1】:用移液槍加染色細(xì)胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通常控制在20-50 cells,當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過200個,需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4)按照以下公式來計算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比,
a,計算每ml細(xì)胞數(shù)目:Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104;【注】:此時的稀釋倍數(shù)為:步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b,總細(xì)胞數(shù)目:Total cells=(Cells/ml)×初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c,細(xì)胞活力值:Viability(%)=(總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù))/總細(xì)胞數(shù)×100
【注】:通常情況,健康的對數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞,活細(xì)胞至少占到95%。
儲存條件:室溫,有效期2年
丙酮中二溴磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
丙酮中滅菌磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲PCR試劑盒
丙酮中毒壤磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中谷硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中乙基谷硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用PCR試劑盒
丙酮中乙基溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
丙酮中磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌PCR試劑盒
丙酮中苯硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌染料法熒光定量PCR試劑盒
丙酮溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒
土壤QC樣-多環(huán)芳烴(PAH) 30克 Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)PCR試劑盒
總余氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 20mL Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒
總余氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 20mL Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒
人血清無機成分電解質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1.6mL*3 Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)PCR試劑盒
戊糖片球菌規(guī)格人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit *
人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒英文名稱:Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products,GTE-AGE ELISA Kit*
人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒英文名稱:human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit進口/原裝
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒 英文名稱:Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit*
人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒英文名稱:Human Pentosidine ELISA Kit*
人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒英文名稱:human hepatitis E virus IgG,HEV-IgG ELISA Kit*
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit*
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