免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
多巴胺受體D5(DRD5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytochrome c antibody150 kDa

鈣調(diào)酸酶(CaN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytoglobin antibody21-29 kDa

胱天蛋白酶12(P12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytoglobin antibody28 kDa

熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytohesin 1 antibody47 kDa

丙酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytohesin 2 antibody47 kDa

Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytohesin 3 antibody46 kDa

維甲酸受體α(RARα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 13 antibody50 kDa

脂酰甘油(PG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 13 antibody50 kDa

脂酸(PA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 14 antibody47-50 kDa

白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 14 antibody47-50 kDa

免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 14 antibody52 kDa

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 15 antibody48 kDa

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 15 antibody49 kDa

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 16 antibody48 kDa

Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 17 antibody48 kDa

骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 17 antibody48 kDa

UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 17-Specific antibody48 kDa

胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 18 antibody48 kDa

胱天蛋白酶7(P7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cytokeratin 18 antibody48 kDa
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