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單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
20號染色體開放閱讀框7抗體 | C20orf7 | BJ-K8176 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
RPMI 1640,(1X),液體(IVD)黃豆黃素(R)-1,1′-聯(lián)萘-2,2′-二基磷酰氯Inhibin beta B 抑制素βB抗原
RPMI 1640,(1X),液體(IVD)大豆苷(R)-1,1′-聯(lián)萘-2,2′-二基磷酰氯Iegrin Alpha3 整合素α3抗原
RPMI 1640,干粉
(IVD)大豆苷元雙(六氟乙酰酮)合銅(II)Iegrin Beta5 整合素β5抗原
染料木素雙(六氟乙酰酮)合銅(II)Iegrin alpha 1 整合素α1抗原
RPMI 1640,干粉
(IVD)染料木苷3-甲氧基硫酚Iegrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Iegrin alpha4,beta7) 整合素α4β7抗原
RPMI 1640,(1X),液體 ( IVD)歐前胡素3-甲氧基硫酚Iegrin AlphaE2/CD103 整合素αE2抗原
DMEM(低糖),液體異歐前胡素3-甲氧基硫酚ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
DMEM(低糖),干粉遠(yuǎn)志酸L-(-)-半乳糖IQGAP1 支架蛋白抗原
MAdCAM-1/Biotin 生物素標(biāo)記粘膜血管定居因子IgG趨化素纖維蛋白肽 B 人類Porcine Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) 檢測試劑盒
Mafa/FITC 熒光素標(biāo)記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A()IgG5號染色體開放閱讀框552-Methoxyestradiol (2-MeOE2)Porcine SIAE (Sialic Acid Acetylesterase) 檢測試劑盒
MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素蛋白連接酶IgG細(xì)胞表面趨化因子受體71-氯-3-甲氧基烷Porcine SLPI (Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) 檢測試劑盒
MAG-a/L-MAG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白-aIgG細(xì)胞色素c氧化酶7A22,6-二氯并噻唑Porcine dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) 檢測試劑盒
MAG-a/b /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白a/bIgGCD362,6-二氯并噻唑Porcine DAF (Decay Accelerating Factor) 檢測試劑盒
MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC 熒光素標(biāo)記黑素瘤抗原-1IgG固酮合成酶CYP11B2N-丁基磺酰胺Porcine ARSA (Arylsulfatase A) 檢測試劑盒
MAGE-A4/FITC 熒光素標(biāo)記黑色素瘤相關(guān)抗原4IgG7號染色體開放閱讀框16N-丁基磺酰胺Porcine CX3CR1 (Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1) 檢測試劑盒
MARCKS /FITC 熒光素標(biāo)記氨酸蛋白激酶C底物MarcksIgG10號染色體開放閱讀框62二酸單乙酯酰氯Porcine GUK1 (Guanylate Kinase 1) 檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框7抗體小煤炱屬Rat β-EPR (Beta-Endorphin Receptor) Kit
羊邊蟲(綿羊無漿體—永壽株)Rat β-EP (Beta-Endorphin) Kit
下彎斯霉Rat BID (BH3 Ieracting Domain Death Agonist) Kit
黃綠木霉Rat BTA (Bladder Tumor Aigen) Kit
黃海芽孢桿Rat BLC (B-Lymphocyte Chemoattracta) Kit
雙孢蘑菇(可訂購)Rat BALP (Bone Alkaline Phosphatase) Kit
絲狀支原體山羊亞種Rat BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) Kit
晶粒鬼傘Rat BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) Kit
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