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丙酮丁醇梭菌說明書

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-30 13:22:33瀏覽次數(shù):197次

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丙酮丁醇梭菌說明書低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  丙酮丁醇梭菌說明書
種屬: Clostridium│acetobutylicum

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 丙酮丁醇

培養(yǎng)基: 0004

生長條件: 35℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
Cr ELISA Kit  大鼠骨膠原交聯(lián)   含量:≥98%

HSCCAg(uman Squamous Cell Carcima Antigen 2) ELISA Kit  人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2含量:≥98%

C I CP ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽 含量:≥98%

Pancreatic carcima markers-CA242 ELISA Kit  人胰腺癌標(biāo)志物CA242  進(jìn)口,*含量:≥98%

ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit  小鼠抗平滑肌抗體   含量:≥98%

Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit  人胃腸癌標(biāo)志物CA199含量:≥98%

M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit  小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30 含量:≥98%

DPD ELISA Kit  大鼠脫/脫啉  進(jìn)口,*含量:≥98%

PY ELISA Kit  大鼠交聯(lián)物   含量:≥98%

NF-KapB p65(Mouse nuclear factor-KapB p65) ELISA Kit  小鼠核因子κB亞基p65親和肽含量:≥97%

mammary carcima Marker-CA153 ELISA Kit  人癌標(biāo)志物-CA153 含量:≥98%

OPN ELISA Kit  大鼠骨橋素  進(jìn)口,*含量:≥98%

GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit  小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa   含量:≥98%

ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit  人卵巢癌標(biāo)志物CA125含量:≥99%

AFP(Alpha-fetoprotein) ELISA Kit  人種胎兒球蛋白/胎蛋白 含量:≥90%
妥英標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:250mg  英文名稱:Fosphenytoin Sodium

七相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:0.2ml  英文名稱:

卡維地相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:15mg  英文名稱:

頭孢地尼標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Cefdinir

牡荊樹提取物標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1.5g  英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract

雷尼替丁相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:50mg  英文名稱:

標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Naphthalene

度西汀雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:10mg  英文名稱:

扁桃標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:500mg  英文名稱:Mandelic Acid (AS)

羧甲基淀粉標(biāo)準(zhǔn)品(A型)  規(guī)格:400mg  英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type A

1,3,3*基2氧雜雙環(huán)[2.2.2]辛  *  英文名稱:Cineole  含量:2N

1,3二羧  *  英文名稱:Glutaricacid  含量:PH4,7,9

1,3二[三(羥甲基)甲氨基]  *  英文名稱:BISTRISpropane  含量:AR

1,3二氨基  *  英文名稱:mPhenylenediamine  含量:BR,85%

1,3二甲基  *  英文名稱:Theophylline  含量:高純,98%

1,3二羥基  *  英文名稱:1,3Propanediol  含量:農(nóng)殘級,99.9%

1,3二羥基丁  *  英文名稱:1,3Butanediol  含量:生物技術(shù)級,97%

1,3二  *  英文名稱:1,3Dihydroxynaphthalene  含量:CP,98.5%

1,4,5,6四氫4,6二氧1,3,5三嗪2羧  *  英文名稱:Potassiumoxonate  含量:USP級,900mcg/mg

1,4,7,10,13,16六氧環(huán)十八  *  英文名稱:18Crown6  含量:CP,98%
丙酮丁醇梭菌說明書D-Allose,98%通用試劑 100MG

N-Acetyl-D-galactosamine,98%通用試劑 100MG

L-(?)-Xylose,≥99%通用試劑 5G

Acesulfame K,≥99.0%通用試劑 25G

D-Pase,≥98%通用試劑 25MG

D-(+)-Melezitose mohydrate,≥99%通用試劑 5G

β-Lactose,≥99%通用試劑 25G

Lactulose,≥95%通用試劑 5G

Maltotriose,≥95%通用試劑 1G

Manse triflate,98%通用試劑 100MG

1,2:5,6-Di-O-isopropylidene-α-D-gluco...通用試劑 25G

3-O-Methyl-D-glucopyrase,≥98%通用試劑 1G

L-(?)-Sorbose,≥98.0%通用試劑 25G

α-Chloralose通用試劑 25G

Inulin from dahlia tubers通用試劑 10G

 

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