當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 網(wǎng)格蛋白重鏈抗體
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 |
英文名稱 | Clathrin heavy chain |
貨號 | BJ-K8261 |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Apaf-1() 凋亡蛋白活性因子-1(N端)左旋肉堿8-溴喹啉histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白(N端多肽)
Activated protein C 活化蛋白C矢車菊素-3-0-葡糖糖苷8-溴喹啉HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病-1/人類免疫缺陷病1型(抗原)
Apelin 脂肪炎癥因子Apelin氯化矢車菊素焦磷酸銅四水合物HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病-1/人類免疫缺陷病1型(抗原)
Apelin receptor Apelin receptor5-羥色胺酸(5-HTP)溴鄰三酚紅Measles virus protein(Pla2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻疹病紅血球凝集素蛋白多肽
APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉亥茅酚苷溴鄰三酚紅Measles virus protein(Pla2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻疹病紅血球凝集素蛋白多肽
APEX1 多功能DNA修復酶異鼠李素-3-O-新橙皮苷LinezolidHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高遷移率族蛋白-1(抗原)
ATH III 凝血酶Ⅲ紫蓳靈; 紫堇靈堿唑來磷酸一水化合物HSL(hormone-sensitive lipase) 荷爾蒙敏感脂肪酸(抗原)
APG4B/AUTL1 細胞自噬相關蛋白4B高麗槐素; 馬卡因唑來磷酸一水化合物HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27(抗原)
組織蛋白酶S7-氟吲哚Porcine β2-GP (Beta2 Glycoprotein) 檢測試劑盒
細胞死亡誘導蛋白4-氯-4'-氟丁酮Porcine αMSH (Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) 檢測試劑盒
前列腺雄激素抑制信號蛋白14-氯-4'-氟丁酮Porcine P 9 (Caspase 9) 檢測試劑盒
磷酸化心肌肌鈣蛋白3-溴-2-甲基吡啶Porcine TTR (Transthyretin) 檢測試劑盒
脊髓灰質炎受體相關蛋白13-溴-2-甲基吡啶Porcine CALU (Calumenin) 檢測試劑盒
19號染色體開放閱讀框73丁二酸單甲酯Porcine FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) 檢測試劑盒
整合素αMIegrin αM丁二酸單甲酯Porcine AST (Aspartate Aminotransferase) 檢測試劑盒
軸突蛋白4/少突膠質細胞2,4′-二溴酮Porcine IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) 檢測試劑盒
網(wǎng)格蛋白重鏈抗體沙漠類芽胞桿Rat IL-23 (Ierleukin 23) Kit
居泉沙雷氏Rat IL-27 (Ierleukin 27) Kit
薄黑孔Rat IL-32 (Ierleukin 32) Kit
釀酒酵母Rat IFABP/FABP2 (Iestinal Fatty Acid Binding Protein) Kit
釀酒酵母Rat MUC2 (Mucin 2) Kit
平菇Rat AR (Amphiregulin) Kit
繩狀青霉Rat KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) Kit
淺黃隱球酵母Rat LDH (Lactate Dehydrogenase) Kit
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質及產(chǎn)品質量。