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木霉保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-24 12:53:12瀏覽次數(shù):174次

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木霉保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱  木霉保存
種屬: Trichoderma│sp.

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 產生纖維素酶

培養(yǎng)基: 0014

生長條件: 25-28℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體,產品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
3-溴-4-羥基酸14348-41-53-溴-4-羥基酸14348-41-5

2,7-二溴-9-芴14348-75-52,7-二溴-9-芴14348-75-5

3,5-二氟1435-43-43,5-二氟1435-43-4

143562-54-3143562-54-3

2,4-二氟酸144025-03-62,4-二氟酸144025-03-6

1-叔氧羰基-4-氨基啶14422-22-01-叔氧羰基-4-氨基啶14422-22-0

1-叔氧羰基-3-氨基啶144243-24-31-叔氧羰基-3-氨基啶144243-24-3

2--4-硝基吡啶 N-氧化物14432-16-72--4-硝基吡啶 N-氧化物14432-16-7

對基1443-80-7對基1443-80-7

3--4-氟酸144432-85-93--4-氟酸144432-85-9

2-酰胺144-48-92-酰胺144-48-9

碳酸鈉144-55-8碳酸鈉144-55-8
鹽羅格列   進口/國產  規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)純度:≥98.0%

澳洲茄邊堿(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥95%,標準品純度:≥98%

澳洲茄堿(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥94.50%,標準品純度:≥97%

安格洛苷 C(標準品)   進口/國產  規(guī)格:>98%,標準品純度:≥97%

托瑞米芬   進口/國產  規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%

托瑞米芬(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:≥98%

來替尼   進口/國產  規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)純度:≥98%

基原薯蕷皂苷(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:≥97%

纖細薯蕷皂苷(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:≥97%

鹽育亨賓   進口/國產  規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%

鹽育亨賓(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:≥99%

妥拉明   進口/國產  規(guī)格:>98.5%,BR純度:≥97%

妥拉明(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC>98.5%,標準品純度:≥97%

維羅非尼,RG7204   進口/國產  規(guī)格:>98.5%,BRaf突變抑制劑純度:97%

白花前胡素E   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:≥98%

白花前胡素(標準品)   進口/國產  規(guī)格:HPLC≥98%,標準品純度:≥97%

CROT/COT  過氧化物酶體肉堿酰基轉移酶一抗    * 0.2ml Nifedipine

PAICS  核糖咪唑羧化酶一抗    * 0.2ml Nimodipine

p70 S6 kinase alpha  化核糖體p70 S6蛋白激酶一抗    * 0.1ml Nimodipine

Protamine 2  魚精蛋白2一抗    * 0.2ml Nitazoxanide

Hepcidin25  鐵調節(jié)蛋白25一抗    * 0.2ml Nitazoxanide

CGR19  細胞生長調控蛋白19一抗(環(huán)指蛋白197)    * 0.2ml Oligomycin A

FPR3/Lipoxin A4 receptor  酰肽受體3一抗(脂氧素A4受體)    * 0.2ml Olopatadine HCl

CHMP1A  染色體修飾蛋白1一抗(金屬蛋白酶1)    * 0.2ml Olopatadine HCl
木霉保存小鼠胸腺上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠胸腺細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠雪旺細胞,MSC細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠牙髓干細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠牙周膜成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠牙周膜干細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

 

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