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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體
β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 |
英文名稱 | Afadin |
貨號(hào) | BJ-K7235 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Toll樣受體8(TLR8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HFE antibody45-58kd
Toll樣受體10(TLR10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HGD antibody50kd
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HGS antibody110-115 kDa
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HHIP antibody79 kDa
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIBADH antibody35 kDa
抑制蛋白β1(ARRβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIBCH antibody38kd
抑制蛋白β2(ARRβ2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIC1 antibody65-70 kDa
防御素β1(DEFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIC5 antibody48kd
胎球蛋白B(FETUB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIF1a antibody120 kDa
載脂蛋白C2(APOC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIF1a antibody120 kDa
載脂蛋白A5(APOA5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIF1AN antibody40 kDa
KSP鈣黏蛋白(CDH16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIGD1A antibody10kd
觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIGD1B antibody
肌微管鈣黏附蛋白(CDH15)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Hikeshi antibody22 kDa
肝腸鈣黏蛋白(CDH17)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Hikeshi antibody22 kDa
白介素12B(IL12B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HINFP antibody60 kDa
白介素35(IL35)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HINT1 antibody14 kDa
白介素35(IL35)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIP1 antibody120 kDa
嗜鉻蛋白A(CHGA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- HIP14/ZDHHC17 antibody70kd
絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體粗糙脈孢菌Cordycepin 蟲草素叢赤殼
朱黃籃狀菌Fluorescein diacetate(FDA) 二熒光素鏈格孢霉
Paenibacillus durusEB Eraser強(qiáng)力EB去除劑 山扁豆生棒孢
解脂假絲酵母DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(無DNase、RNase ) 燕麥鐮孢
加德納菌iFluorTM 555 phalloidin iFluor™ 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)平截刺盤孢菌
長(zhǎng)蠕孢Digoxin 殼囊孢
褐囊蜜環(huán)菌iFluorTM 647 phalloidin iFluor™ 647標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(遠(yuǎn)紅)黃籃狀菌
野土地桿菌iFluorTM 488 phalloidin iFluor™ 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)殼囊孢霉(加詞待譯)
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