客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱：EDANS鈉鹽

規(guī)格：1 g/10 g

貨號：BJP1259

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

染料法

探針法　

可進行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實驗報告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴增曲線

·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

?

檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

Caki-2（人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞）報價SignalSilence® Bub1b siRNA I1 mg

J774A.1（小鼠單核巨噬細(xì)胞）價格GSK343100 ul

NCI-H1688（人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）價格Phospho-Jak1 (Tyr1034/1035)/Jak2 (Tyr1007/1008) (E9Y7V) Mouse mAb100 ul

NCI-H2170（人肺鱗癌細(xì)胞）報價BSA (D4L9G) Mouse mAb100 ul

SW 1353（人軟骨肉瘤細(xì)胞）現(xiàn)貨供應(yīng)EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

CTLA4 Ig-24（中國倉鼠卵巢細(xì)胞）說明書Arginase-1 (D4E3M™) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)300 ul

人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書SignalSilence® AMPKα2 siRNA II100 ul

大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基價格USP15 (D1K6S) Rabbit mAb300 ul

小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)SignalSilence® p38γ MAPK siRNA I100 ul

小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基報價PHGDH (D8F3O) Rabbit mAb100 ul

McCoy's 5A（不含HEPES）現(xiàn)貨供應(yīng)Dectin-1 (E1X3Z) Rabbit mAb (PE Conjugate)500 ul

骨化三醇實驗方法SimpleChIP® Human ATF-3 Exon 1 Primers100 ul

白頭翁皂苷B4 129741-57-7*TBC1D1 (D2Y8M) Rabbit mAb100 ul

百秋李醇5986-55-0實驗步驟NaPi2b/SLC34A2 (D3V3I) Rabbit mAb100 ul

表兒茶素沒食子酸酯1257-08-5實驗方法Lunatic Fringe (D6V2V) Rabbit mAb100 ul

槐角苷152-95-4 實驗步驟ETS-2 (D6L4J) Rabbit mAb100 ul

蔗果四糖13133-07-8價格cGAS (D1D3G) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
EDANS鈉鹽Aspergillus│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗真菌；抗白色念珠菌培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Micromonospora│sp.分離基物: 樹根土斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗細(xì)菌；抗金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C存儲條件: 真空冷凍干燥

蠟狀芽孢桿菌種屬: BacilluscereusFranklandandFrankland安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃

Candida│albicans凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于海洋科學(xué)研究培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Nigrospora│sp.分離基物: 華山松皰銹病感病植株樹皮凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Streptomyces│cyaneus分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物代謝調(diào)控研究培養(yǎng)基: 39生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Acinetobacter│baumannii分離基物: 痰凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Streptomyces│lavendulocolor分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Tricholoma│equestre var. equestre (L.) P. Kumm.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
操作程序：

由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。