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SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2019-03-01 14:12:54瀏覽次數(shù):246次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集細胞RNAwait的用量是1ml。

SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書的詳細介紹:

DNA提取流程圖:
?公司SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產品:點擊了解更核酸電泳及回收
1、RNA純化系列產品
2、DNA純化系列產品
3、電泳及回收系列產品
4、探針標記及檢測系列產品
5、核酸擴增系列產品
6、克隆表達系列產品
7、基因組研究系列產品
8、蛋白質研究系列產品
9、細胞生物學研究系列產品
10、即用型溶液、質粒庫、菌種庫等等
實驗步驟:
(1)SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應注意哪些問題?
答:SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書當DNA 段長度較長(5   kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
    1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
    2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
注意事項:
● SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
氧化苦參堿(標準品) Oxymatrine 16837-52-8 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

氧化苦參堿 Oxymatrine 16837-52-8 質量規(guī)格:≥98%,BR

氧化槐果堿(標準品) Oxysophocarpine 26904-64-3 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

氧化槐定堿(標準品) oxysophoridine 54809-74-4 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

氧化鋯(>98%,BC) Zirconium (IV) oxide 1314-23-4 質量規(guī)格:>98%,BC

氧化鈣(塊)(>98%,BR) Calcium oxide lump 1305-78-8 質量規(guī)格:>98%,BR

氧化鈣(>98%,BR) Calcium oxide (Lime) powder 1305-78-8 質量規(guī)格:>98%,BR

氧化鉍 Bismuth oxide  1304-76-3 質量規(guī)格:AR,>99%

氧化白藜蘆醇(標準品) Oxyresveratrol 29700-22-9 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

氧化白藜蘆醇 Oxyresveratrol 29700-22-9 質量規(guī)格:≥98%,BR

氧氟沙星N-氧化物醋酸鹽(非對映異構體混合物) Ofloxacin N-Oxide Acetic Acid Salt (Mixture of Diastereomers) 104721-52-0 質量規(guī)格:美國進口

氧氟沙星(標準品) Ofloxacin 82419-36-1 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

氧氟沙星 Ofloxacin 82419-36-1 質量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

洋薊素;1,5-二咖啡酰奎寧酸(標準品) 1,5-Dicaffeoylquinic acid 30964-13-7 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

洋川芎內酯I(標準品) Senkyunolide I 94596-28-8 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

洋川芎內酯H(標準品) Senkyunolide H 94596-27-7 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

洋川芎內酯A(標準品) Senkyunolide A 62006-39-7 質量規(guī)格:鑒別用,標準品

洋艾素(標準品) ABSINTHIN 1362-42-1 質量規(guī)格:供含量測定用

楊芽黃素(標準品) Tectochrysin 520-28-5 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SYBR Green II 核酸染料100 μL說明書Itraconazole規(guī)格:>99%,EP6,BR,可用于細胞培養(yǎng)

Itraconazole規(guī)格:HPLC>98%,標準品

ITP•Na3規(guī)格:>95%,BR

ItoprideHydrochloride規(guī)格:含量測定

Itaconicacid規(guī)格:>98%,BR

Isovitexin規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

Isoviolanthrone規(guī)格:

Isovanillin規(guī)格:>98%,BR

Isovanillin規(guī)格:>99%,標準品

Isotretinoin規(guī)格:>99.0%,BR

 

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