選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱：大鼠NOGO-A elisa試劑盒
英文名稱：Rat NOGO-A ELISA kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
3-溴-5-氯苯 304854-55-5三七皂苷 R1線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)>98.0%(GC)

2-氯-6-甲基煙酸 30529-70-5馬兜鈴酸 A線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2-氯-6-甲基煙酸 30529-70-5樟腦轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

S-芐基-L-半胱氨酸 3054-01-1α-香附酮轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

S-芐基-L-半胱氨酸 3054-01-1梔子苷白介素6(IL6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2,9-二乙酰鳥嘌呤 3056-33-5貝母素甲白介素6(IL6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥95%

2,9-二乙酰鳥嘌呤 3056-33-5貝母素乙白介素6(IL6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥95%

2,9-二乙酰鳥嘌呤 3056-33-5葛根素抗腦組織抗體(ABAb)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥95%

L-天門冬氨酸-4-叔丁基酯 3057-74-7綠原酸白介素8(IL8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

L-天門冬氨酸-4-叔丁基酯 3057-74-7人參皂苷 Re白介素8(IL8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

L-天門冬氨酸-4-叔丁基酯 3057-74-7熊去氧膽酸白介素8(IL8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

N6-苯甲?；?脫氧腺苷 305808-19-9大黃素白介素9(IL9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

對(duì)苯 3058-39-7大黃酸抗繆勒管激素(AMH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

對(duì)苯 3058-39-7大黃素甲抗繆勒管激素(AMH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

優(yōu)降寧 306-07-0乙酸龍腦酯瘦素受體(LEPR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

人乙型肝炎病毒X蛋白結(jié)合蛋白(HBXIP)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Virgisporangium aurantiacum

人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli

人膠原C端肽酶(PCP)ELISA Kit，48T/96T  拉丁屬名: Trichoderma  longibrachiatum

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces malaysiensis

人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: perfringens Type C

人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Microbacterium sp.
大鼠NOGO-A elisa試劑盒細(xì)胞短鏈烯脂酰輔酶A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量　WASL 　100 ul

細(xì)胞中鏈烯脂酰輔酶A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量　ACHE(Acetylcholinesterase) 　100 ul

細(xì)胞長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量　WBP2 　100 ul

組織酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量　VSTM2L 　100 ul

植物磷脂酶D alpha（Phospholipase D alpha）活性比色法定量　VSX2 　100 ul

植物磷脂酶D alpha（Phospholipase D alpha）活性熒光定量　VSX1 　20 ul

細(xì)胞磷脂酶C（Phospholipase C）活性化學(xué)比色法定量　VSX1 　100 ul

組織磷脂酶C（Phospholipase C）活性化學(xué)比色法定量　VSX2 　100 ul

細(xì)菌磷脂酶C（Phospholipase C）活性化學(xué)比色法定量　LECT2(Leukocyte cell-derived chemotaxin-2) 　100 ul

細(xì)胞磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量　VTA1 　100 ul

組織磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量　VPS24 　100 ul

細(xì)菌磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量　VPS18 　100 ul

血液酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量　VPS28 　100 ul

體液酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量　VPS28 　100 ul

細(xì)胞磷脂酶A2（Phospholipase A2）活性比色法定量　VPS33A 　20 ul

組織磷脂酶A2（Phospholipase A2）活性比色法定量　VN1R4 　100 ul
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。