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貨號 | GOY-01S6455 |
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6455 |
商品介紹
測定意義 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。 測定原理: 采用pH示差法測定花色苷含量,當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在530處無吸收峰, 利用此特性分別測定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響,排除了其他非花色苷類物質(zhì)對檢測結(jié)果的干擾。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
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植物花色苷可見分光光度法檢測試劑盒A甙甜菊糖 97%A型流感病-NS1抗體(神經(jīng)氨1)CCDC28A 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體
甜菊苷 80%去素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去素轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體CCDC25 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體
烯酰, 96%,含~0.05% 噻吩穩(wěn)定劑化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體CCDC23 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體
正丁酰 98%新的飽食分子蛋白抗體CCDC22 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體
2-酰 97%脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體CCDC21 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體
乙酰 CP,97%性受體NK-p80抗體CCDC18 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體
癸酰 98%粘附分子CD112抗體CCDC17 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體
庚酰 99%腎小球粘附分子受體抗體CCDC160 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160抗體
己酰 98%成纖維核受體Nr5a2抗體CCDC16/ZNF83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體
烯酰 95%鈉鈣交換蛋白1抗體CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體
辛酰 99%鈉鈣交換蛋白3抗體CCDC158 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體
三乙酰 98%天冬氨受體抗體CCDC157 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體
特戊酰 98%化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體CCDC153 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體
正戊酰 98%Nemo樣激抗體CCDC148 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體
2-氨-5-硝二酮 98%化Nemo樣激抗體CCDC147 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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