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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
鞘氨醇單胞菌 | 僅供科研 | GOY-01J6370 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
二溴化鈀 Pd 40 % 腺嘌呤鹽 99%Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1070) 化谷受體2B抗體
氯鈀酸 Pd 26.2%6-芐嘌呤 99%Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1472) 化谷受體2B抗體
氯化鈀 Pd 59-60%4-氯-2,5-二甲氧基苯 98%Anti-NR2C/NMDAR2C 谷受體2C抗體
氯鉑酸 98%1,4-二甲氧基苯 99%Anti-NR2D/NMDAR2D 谷受體2D抗體
硝酸鈀 Pd 18.09 wt. % in nitric acid2,5-二乙氧基苯 97%Anti-N-Ras 原癌基因抗體
硝酸鈀(II) 水合物 Pd ≥39.0%2,5-二甲氧基苯 97%Anti-NR1D1/REV-ERB alpha 核受體Rev-Erbα抗體
氫氧化鈀 AR,99.99%2,4,5-三氯苯 分析標準品,99%Anti-Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59) 化核受體Rev-Erbα抗體
氫氧化鈀 20% Pd2,4,5-三氯苯 97%Anti-Nrf2 核因子2相關因子2抗體
鞘氨醇單胞菌雙十烷二 80% 水溶膠Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α清蛋白兔素相關蛋白A(CAPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,6-二硝酚 96%Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙酰-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨兔REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
N,N-二乙 99%Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 人鐵傳遞蛋白/鐵蛋白兔賴氨酰氧化樣蛋白4(LOXL4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
N,N-二十二烷-N-氧化物 95%Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 人腦紅蛋白兔多聚蛋白1(MMRN1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
β-甘油鈉 98%,五水Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的牛血清白蛋白殘留檢測兔髓過氧化物抗體(Anti-MPO)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二乙炔 99%Human amyloid beta peptide 1-40,A Beta1-40 ELISA Kit 人β淀粉樣蛋白1-40兔鈣調(diào)素(CAM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
N,N'-二脲 98%Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓脂堿性蛋白兔核孔蛋白160kda(NUP160)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
N,N'-二脲 95%Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1兔叉頭框蛋白O4(FOXO4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,4-二氫-2H- 98%Human desmin,Des ELISA Kit 人結(jié)蛋白兔原卟啉原氧化(PPOX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,2'-二羥聯(lián) 99%Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白兔胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二巰 97%Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 人S100B蛋白兔巨噬活化因子(MAF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,5-二 分析標準品Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 人巨噬炎性蛋白2兔Ⅱ(F2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,5-二 98%Human gelson ELISA Kit 人凝膠原蛋白兔載脂蛋白A4(ApoA4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,5-二酚 分析標準品Human talin ELISA Kit 人踝蛋白兔肌鈣蛋白T(Tn-T)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,5-二酚 98%Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化內(nèi)分泌因子兔煙酰腺嘌呤二核苷氧化5(NOX5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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