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接近棒桿菌

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更新時間:2022-04-19 10:05:57瀏覽次數(shù):145次

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微生物菌種的培養(yǎng):

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。

⑵ 霉菌孢子的制備 

霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備 

搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備 

種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。

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產品名稱

用途

貨號

接近棒桿菌

僅供科研

GOY-01J7426

 

菌種的培養(yǎng):

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
QQ截圖20220323162239.png

保存方法:

傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法:

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。

1,1,2-基-1H-苯并[e] 98%鋨粉 99.9% metals basisAnti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC  熒光素標記化富含脯的激2抗體IgG

二酸叔丁基乙酯 95%AR,99.95%Anti-FAM3A/FITC  熒光素標記胰腺衍生因子抗體IgG

二乙烯苯, 包含1000ppm 4-叔丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑, Standard for G海綿鉑 99.95%Anti-FAM3B/PANDER /FITC  熒光素標記胰腺衍生因子抗體IgG

二乙烯苯 80%海綿鉑 99.99%Anti-FANCD2/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠FANCD2抗體IgG

二乙烯苯 50%海綿鈀 99.95% metals basisAnti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化FANCD2抗體IgG

二乙烯苯 55%海綿鈀 99.99%Anti-FANCF/FITC  熒光素標記范可尼貧血相關蛋白F抗體IgG

1,4-二乙基苯( PDEB ) GCS, ≥99.5% (GC) 釕粉 99.9% metals basisAnti-FAS/FITC  熒光素標記FAS蛋白抗體IgG

N,N-二乙基苯 CP釕標準溶液 1000μg/mlAnti-FASN/FITC  熒光素標記抗脂肪酸合成抗體IgG

接近棒桿菌1,1-環(huán)二羧二酯  97%Human cecropin B,CecB ELISA Kit  人殺菌肽B兔腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(S)-4--3-羥丁乙酯  96%Human Attacin,Att ELISA Kit  人抗菌肽兔XV 型膠原(COL15)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

氧化亞銅 99%Human granulysin,GNLY ELISA Kit  人顆粒溶素兔載脂蛋白D(ApoD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

酚紅鈉鹽 70%Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit  人富組蛋白兔微粒體S轉移1(MGST1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,4-環(huán)己二烯 97%Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit  白樣轉錄體受體兔過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4--2-三氟喹啉 97%Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA Kit  人絲狀血球凝集素兔促睡眠肽α(δSIP-α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

環(huán)己 Standard for GC,>99.0% (GC)Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit  人絨毛蛋白/埃茲蛋白兔前列腺素E合2(PTGES2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,2-環(huán)己二酮二肟 97%Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit  人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A兔骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白1(GREM1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(S)-(-)-1-(4-)乙 97%,ee值98%Human dystrophin ELISA Kit   人肌養(yǎng)蛋白兔蛋白(PP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4--2-氟 98%Human Collectin ELISA Kit   人膠原凝集素兔著絲粒蛋白B(CENPB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

3-環(huán)己-1-炔 97%Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit   人伴侶蛋白10兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硫化鈣 99%Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit  人纖調蛋白兔Salusin α蛋白(Salusin α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

氟化銫 99.99% metals basisHuman Calreticulin,CRT ELISA Kit   人鈣網蛋白兔半糖苷β(GLβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4--3,5-二異噁唑 98%Human omentin ELISA Kit  人網膜素兔β素(bTC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2--1,4-醌 95%Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit  人質γ羧谷氨蛋白兔多巴色素異構(DT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

 


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