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破骨細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 09:16:10瀏覽次數(shù):153次

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科研細胞
貨號 GOY-01X1032
破骨細胞公司正在出售的產(chǎn)品:98886-44-3噻唑磷;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
異鼠李-3-O—新橙皮 規(guī)格: 10mg
酞丁 規(guī)格: 50mg
152743-19-6石吊蘭 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
22427-39-0人參皂Rg1 規(guī)格: 20mg
83-95-4茵芋;Skimmianine 規(guī)格: 20mg
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厚樸 規(guī)格:

公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

破骨細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1032

商品介紹:

名稱 破骨細胞

2.組織來源:骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

破骨細胞分離自骨組織和骨髓;破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

5.方法簡介:

()實驗室分離的人破骨細胞采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

()實驗室分離的人破骨細胞經(jīng)TRAP染色檢測,純度可達30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H109

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)多核巨細胞

傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

1瓶 Jurkat,Clone E6-1 [Jurkat E6-1]細胞株 Jurkat,Clone E6-1 [Jurkat E6-1] 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proteinase-activated receptor 2

SB培養(yǎng)基 SB Medium 250g 0.156-10 ng/mL 人白介素1受體相關(guān)激1(IRAK-1)ELISA試劑盒

500µg T4 噬菌體基因 32 蛋白 T4 Gene 33 Protein -20℃保存

破骨細胞Rabbit Anti-rat IgG/Bio  標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

2mL 氨基磁珠 Magnetic beads,Amino 4℃密閉、豎直保存

1瓶 PC12細胞株 PC12 低溫運輸和保存

7.5%氯化鈉肉湯培養(yǎng)基(2015藥典)  250g

1 管 MG1655大腸桿菌 MG1655 E.coli Strain -80℃保存

1%聚酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 1%Tween 80-Corn Agar Medium 250g

RNF40  環(huán)指蛋白40抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP4K1(Ser171)  磷酸化造祖細胞激抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MyoD1(Ser200)  磷酸化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlSAMD3  SAMD3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ADAMTSL3  整合素樣金屬蛋白與凝樣2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

DRAM  DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

DYDC1  DYDC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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