實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞：SK-N-MC 

別稱SKNMC; SK-NM-C; SK-NMC

年齡（性別）女；14歲

組織來源腦；眶上區(qū)神經(jīng)上皮瘤轉(zhuǎn)移灶

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述SK-N-MC細(xì)胞是由Biedler·J·L建立的兩株神經(jīng)組織來源的細(xì)胞中的一株(另一株是SK-N-SH細(xì)胞)；于1971年9月分離得到。SK-N-MC細(xì)胞有中度的多巴胺-β-羥化酶活性，也有可用甲醛誘導(dǎo)熒光指示的細(xì)胞內(nèi)兒茶酚胺。最初被認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，但后來被證明來自于Askin腫瘤。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~32-48 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in hamster cheek. Yes, in nude mice.

抗原表達(dá)情況Blood Type O; Rh+

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 TrkA / NTRK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 B7-H3 / CD276 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD131 / C

神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞：SK-N-MC Rabbit Anti-rat IgM/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlPLGLB2  纖溶相關(guān)蛋白B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-APS(Ser598)  磷酸化APS抗體 規(guī)格: 0.1ml

發(fā)酵管  20支

CD3 epsilon  CD3抗體 0.1ml

500mL Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X 常溫保存

100g 聚乙二醇 PEG 室溫

2 ug pcDNA3.1（+）/GFP pcDNA3.1（+）/GFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL RNase-free SDS溶液,10%  常溫

1套 GST 固定試劑盒 GST  Immobilization Kit -20℃保存

2 ug pLAMBLA1305.2 pLAMBLA1305.2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50T 侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

phospho-CSF1R(Tyr923)  磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml